時(shí)間：2023-03-01 16:21:52
序論：好文章的創(chuàng)作是一個(gè)不斷探索和完善的過(guò)程，我們?yōu)槟扑]十篇圍棋學(xué)習(xí)計(jì)劃范例，希望它們能助您一臂之力，提升您的閱讀品質(zhì)，帶來(lái)更深刻的閱讀感受。
總結(jié)大家的言論以及我自己的一些個(gè)人經(jīng)驗(yàn)，我認(rèn)為同學(xué)們?cè)谏蠈W(xué)期沒(méi)有取得較好成績(jī)主要有如下的原因：
1、同學(xué)們剛從高中升上來(lái)，以前受高中生活的束縛無(wú)法自由自在的生活，現(xiàn)在解脫了，就有點(diǎn)把持不住了，總想著怎么玩，怎么快樂(lè)的生活，在學(xué)習(xí)方面也就不那么關(guān)心了，學(xué)習(xí)的壓力比以前輕了，沒(méi)有壓力也就沒(méi)有動(dòng)力，自然不愿學(xué)習(xí)。
2、還有一個(gè)很現(xiàn)實(shí)的原因是我們從小到大學(xué)習(xí)的目標(biāo)就是為了上大學(xué)而不是為了自己而學(xué)習(xí)，沒(méi)有做學(xué)問(wèn)的精神?，F(xiàn)在上大學(xué)了，夢(mèng)想實(shí)現(xiàn)了，沒(méi)有夢(mèng)想的支撐，就變得迷茫，找不到行動(dòng)的方向，找不到行動(dòng)的目標(biāo)，不知道自己該干什么了，學(xué)習(xí)不是，不學(xué)習(xí)也不是，在搖擺不定中就把時(shí)間度過(guò)了，結(jié)果學(xué)習(xí)成績(jī)就不太理想。
3、大學(xué)課程的設(shè)置并不是十分的令人滿意，某些課程枯燥無(wú)味，激發(fā)不起同學(xué)們的學(xué)習(xí)興趣，引起學(xué)生的反感，最后導(dǎo)致逃課現(xiàn)象的泛濫，逃課成自然成習(xí)慣了，學(xué)習(xí)就被拋腦后了，成績(jī)自然不太好。
4、校園對(duì)同學(xué)們而言，是一個(gè)比較安全，比較安逸的場(chǎng)所，不能讓人產(chǎn)生斗志或是產(chǎn)生讓人想要保護(hù)自己的欲望，最后的結(jié)果就是無(wú)法產(chǎn)生實(shí)際的行動(dòng)保證自己較好的成績(jī)。
在總結(jié)以上原因的基礎(chǔ)上，我這學(xué)期的初步計(jì)劃是：
1、抓好同學(xué)們的上課出勤率，對(duì)無(wú)故曠課的同學(xué)做思想工作
2、記好每個(gè)老師的作業(yè)，多提醒同學(xué)們按時(shí)完成作業(yè)，按時(shí)交發(fā)同學(xué)們的作業(yè)
3、幫助同學(xué)們解決好學(xué)習(xí)必需品的問(wèn)題(如：教材的訂購(gòu)、上課用品的借還，教室的申請(qǐng)、下學(xué)期課程的安排)
4、深入廣大同學(xué)中，認(rèn)真聽(tīng)取同學(xué)的意見(jiàn)、建議和要求，為同學(xué)們服務(wù)
5、努力配合老師的工作，成為老師與同學(xué)們交流的紐帶，同學(xué)們的意見(jiàn)可通過(guò)我轉(zhuǎn)達(dá)給老師們
【關(guān)鍵詞】 細(xì)胞圖案化，組織工程，細(xì)胞傳感器，自組裝單層膜，軟刻蝕，評(píng)述
Abstract The technologies that we call cell micropatterning allow the control of the shape and size of cell adhesion. Combination of micro/nano technology， surface chemistry， electrochemistry and photochemistry enables us to control the adhesion， migration， differentiation of cells and the interactions between different types of cells. These methodologies bring about a new platform for the studies of cell biology. A number of techniques for cell patterning and compares their advantages and disadvantages were reviewed in this article. The applications of cell micropatterning， including those for fundamental studies in cell biology， tissue engineering and cellbased biosensors were also discussed.
Keywords Cell micropatterning， tissue engineering， cellbased biosensors， selfassembled monolayer， soft lithography， review
1 引 言
20世紀(jì)70年代，用于生物分子和細(xì)胞的圖案化技術(shù)已開(kāi)始出現(xiàn)[1]。細(xì)胞圖案化技術(shù)主要分為兩類(lèi)：一類(lèi)是通過(guò)表面修飾形成細(xì)胞粘附生長(zhǎng)的圖案化區(qū)域，使細(xì)胞選擇性地粘附生長(zhǎng)形成圖案；另一類(lèi)是通過(guò)可移除的物理障礙將細(xì)胞限制在圖案化的區(qū)域生長(zhǎng)，形成細(xì)胞圖案?；谏鲜鰞煞N原理，各種細(xì)胞圖案化技術(shù)相繼出現(xiàn)并得到發(fā)展[2]。
在眾多的圖案化技術(shù)中，細(xì)胞大多被固定在二維平面。人們發(fā)現(xiàn)基底的形貌和物理性質(zhì)會(huì)對(duì)細(xì)胞的功能產(chǎn)生很大的影響，而且大部分高等動(dòng)物細(xì)胞（除血球細(xì)胞等少數(shù)幾種細(xì)胞）都是貼壁生長(zhǎng)的，這為圖案化技術(shù)在生物學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。在基礎(chǔ)生物學(xué)方面，圖案化技術(shù)可以建立兩種或兩種以上的細(xì)胞共培養(yǎng)體系，已成為揭示細(xì)胞與細(xì)胞以及細(xì)胞與基底相互作用基本機(jī)理的有力工具。另一方面，圖案化能將細(xì)胞精確定位在表面，這將在很大程度上促進(jìn)細(xì)胞傳感器和分子傳感器的發(fā)展。目前，二維細(xì)胞圖案化技術(shù)已在生物學(xué)領(lǐng)域受到廣泛關(guān)注。
2 細(xì)胞圖案化的方法
2.1 光刻技術(shù)
光刻技術(shù)最初應(yīng)用于半導(dǎo)體產(chǎn)業(yè)中，該技術(shù)利用紫外光將掩膜上的幾何圖案轉(zhuǎn)移到基底上(見(jiàn)圖1)。首先在基底上鋪一層光敏聚合物——光刻膠，然后基底在光掩膜覆蓋下曝光顯影形成圖案。表面修飾材料(如蛋白質(zhì)等)吸附在基底表面后，將基底浸入到有機(jī)溶劑中洗刻膠，即可在底面上形成表面修飾蛋白質(zhì)的圖形，細(xì)胞會(huì)按照已修飾的圖形粘附和生長(zhǎng)，形成細(xì)胞圖案[3]。
光刻技術(shù)以其較高的精確度成為固體表面圖案化的主要手段。但是，光刻過(guò)程需要潔凈空間和昂貴的設(shè)備，并且對(duì)于實(shí)驗(yàn)者要求較高，限制了其在生物技術(shù)方面的廣泛應(yīng)用。此外，光刻加工過(guò)程采用的化學(xué)溶劑容易使生物大分子變性，使它們失去活性[4]。
2.2 軟刻蝕技術(shù)
近年來(lái)，Whitesides 等[5，6]研究了一系列更具生物相容性的圖案化方法，統(tǒng)稱(chēng)為“軟刻蝕”。軟刻蝕技術(shù)通過(guò)使用高分子聚合物，如聚二甲基硅氧烷(polydimethylsiloxine， PDMS)，在有圖案的底模上形成印章，達(dá)到復(fù)制微米甚至納米尺度結(jié)構(gòu)的目的(圖2)。
與光刻技術(shù)相比，軟刻蝕最大的優(yōu)點(diǎn)在于制作過(guò)程更簡(jiǎn)便[6]。軟刻蝕僅需要在制備底模時(shí)做一次光刻，而其后的過(guò)程在普通實(shí)驗(yàn)室就可完成，將對(duì)潔凈空間的要求降到最低。因?yàn)榈啄：陀≌驴杀恢貜?fù)利用，軟刻蝕比光刻更加經(jīng)濟(jì)、方便和有效。此外，PDMS 的彈性可以使它容易在曲面和外形可變的基底上進(jìn)行圖案化，透明、自發(fā)熒光低的特點(diǎn)使得某些樣品可在光學(xué)顯微鏡下直接觀察。軟刻蝕的這些優(yōu)點(diǎn)使它正成為細(xì)胞圖案化的主要方法，常用到的有微接觸印刷、微流控圖案化以及模板圖案化；其中微接觸印刷、微流控以及上述的光刻都屬于通過(guò)表面修飾形成圖案化的方法，障礙物限制細(xì)胞遷移來(lái)實(shí)現(xiàn)圖案化的方法。
2.2.1 微接觸印刷
微接觸印刷(microcontact printing ， μCP)技術(shù)最早用于將硫醇轉(zhuǎn)移到金表面，形成圖案化的自組裝單層膜(selfassembled monolayers， SAMs)[7]。用 PDMS復(fù)制光刻的微結(jié)構(gòu)即獲得微接觸印刷所需要的印章（圖2A），將印章在硫醇溶液中浸泡以后，用氮?dú)饣蛘邏嚎s空氣使其表面的圖案干燥。印章表面的圖案與金表面相接觸，硫醇分子從印章凸面轉(zhuǎn)移到金表面上形成SAMs；印章凹面未與底面接觸，所以其對(duì)應(yīng)的基底是裸露的。這一過(guò)程完成后，將金表面置于另一種硫醇溶液中，第二種硫醇分子將覆蓋金表面的裸露部分，這樣就在同一個(gè)金表面上形成了兩種類(lèi)型的SAMs，并且具有不同的表面性質(zhì)。例如：以甲基結(jié)尾的硫醇形成的SAMs能夠促進(jìn)細(xì)胞粘附，以聚乙二醇 (polyethylene glycol ， PEG) 結(jié)尾的硫醇形成的SAMs則抗拒細(xì)胞粘附，當(dāng)細(xì)胞被接種到這個(gè)表面后，它僅在甲基結(jié)尾的SAMs上粘附。這些為控制細(xì)胞的形狀、大小等奠定了基礎(chǔ)(圖3a)。
微接觸印刷的使用范圍不僅僅局限于金表面，在聚乙二醇修飾的玻璃和二氧化硅表面同樣可以使用[8]。如上所述，傳統(tǒng)的微接觸印刷只能形成一種或兩種分子圖案，只有使用多級(jí)印章才可以形成多種分子的圖案[9]，但其制備過(guò)程相對(duì)復(fù)雜。
2.2.2 微流控圖案化
微流控圖案化是一個(gè)與微接觸印刷相關(guān)的過(guò)程(圖2B)，但與微接觸印刷不同的是PDMS模板底面具有微通道網(wǎng)絡(luò)。當(dāng) PDMS 模板與底面接觸后就形成微流管道，在管道的開(kāi)口處加入溶液，液體可以進(jìn)入管道并在表面吸附形成圖案[10]；引入液體的方法可以依賴(lài)毛細(xì)作用或注射泵[11，12]。微流控圖案化可相對(duì)簡(jiǎn)便地產(chǎn)生多種分子修飾。與微接觸印刷相比，微流控圖案化的優(yōu)點(diǎn)是不需要對(duì)修飾在表面的分子進(jìn)行干燥，這樣就易于將一些敏感分子(如不穩(wěn)定的蛋白或酶)修飾在表面，并且維持其生物活性。由于微流控圖案化是運(yùn)用不同分子的溶液來(lái)形成圖案，通常每一種分子的圖案在表面上都是連續(xù)分布的[13]，這就限制了圖案形狀的多樣性。
2.2.3 模板圖案化
用于細(xì)胞圖案化的“模板”，就是指帶有一定幾何形狀和大小的透孔的膜。PDMS是模板圖案化的合適材料，因?yàn)樗c大多數(shù)的干燥表面都能緊密結(jié)合。模板的制作類(lèi)似于微接觸印刷的印章，但在PDMS固化之前使液體 PDMS不完全覆蓋表面結(jié)構(gòu)（即表面微結(jié)構(gòu)的高度要大于PDMS液面的高度），之后將固化的PDMS從模板上剝離下來(lái)就會(huì)得到具有透孔的 PDMS 模板(圖2C)。膜與基底緊密接觸后，透孔處的底面就被暴露出來(lái)，其它區(qū)域仍被PDMS膜覆蓋。因?yàn)榧?xì)胞僅在暴露的基底粘附，所以揭去模板后細(xì)胞就會(huì)在基底上形成設(shè)計(jì)的圖案[14，15]。模板圖案化是一種不需要對(duì)基底進(jìn)行化學(xué)修飾即可進(jìn)行細(xì)胞圖案化的方法。該方法制作圓形、方形等簡(jiǎn)單圖案比較容易，但邊角比較多的圖案在PDMS的剝離過(guò)程中易損壞。
3 細(xì)胞圖案化的生物學(xué)應(yīng)用
3.1 細(xì)胞生物學(xué)基礎(chǔ)研究
細(xì)胞圖案化最重要的應(yīng)用就是研究細(xì)胞的基礎(chǔ)機(jī)制和特性，在二維表面上控制細(xì)胞大小和空間排布的能力，為細(xì)胞生物學(xué)研究提供了新的工具。體內(nèi)的細(xì)胞并非封閉的單元，它與周?chē)募?xì)胞以及胞外基質(zhì)之間有著諸種聯(lián)系，它們不僅僅是加強(qiáng)細(xì)胞之間的機(jī)械連接，更參與了物質(zhì)交換和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程[16]。當(dāng)細(xì)胞在基底上粘附時(shí)，依賴(lài)細(xì)胞膜上的整合素和細(xì)胞外基質(zhì)相連。整合素首先聚集在一起，然后募集各種結(jié)構(gòu)蛋白和信號(hào)蛋白形成粘著斑[17]。整合素與胞外基質(zhì)連接的改變，最終將導(dǎo)致細(xì)胞骨架的重新排列，使細(xì)胞可以在表面鋪展和遷移[18]。無(wú)論是在胚胎發(fā)育還是整個(gè)生命過(guò)程，細(xì)胞與細(xì)胞之間及細(xì)胞與胞外基質(zhì)之間的連接對(duì)于組織形態(tài)結(jié)構(gòu)的形成和發(fā)揮其功能特性都具有特殊作用，例如當(dāng)神經(jīng)細(xì)胞之間的連接喪失以后，興奮的傳導(dǎo)就會(huì)中斷，這將直接造成相應(yīng)的神經(jīng)退行性疾病。
表面圖案化技術(shù)已經(jīng)證實(shí)細(xì)胞形狀以及細(xì)胞連接的改變會(huì)影響細(xì)胞的分裂增殖[19，20]和分化[21]。可以利用大小、形狀以及構(gòu)造不同的圖案來(lái)控制細(xì)胞與細(xì)胞之間以及細(xì)胞與基底之間的連接。圖案化技術(shù)可作出一系列面積逐漸增大的圖案，這些圖案上粘附細(xì)胞的數(shù)目將隨面積的增大而增多，細(xì)胞間連接也因此增多。用領(lǐng)結(jié)型圖案培養(yǎng)細(xì)胞就可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞形狀和細(xì)胞連接的同時(shí)控制。設(shè)計(jì)合適尺寸的圖案使“領(lǐng)結(jié)”兩端分別僅夠粘附一個(gè)細(xì)胞，這樣兩個(gè)細(xì)胞只在“領(lǐng)結(jié)”的中間區(qū)域有連接，所以該區(qū)域的寬度就決定了細(xì)胞連接的程度[22，23]。細(xì)胞與細(xì)胞之間的連接在體內(nèi)的許多生理過(guò)程中都發(fā)揮著重要作用。例如，血管內(nèi)皮細(xì)胞之間的緊密連接是血腦屏障的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。而在血管生成過(guò)程中，內(nèi)皮細(xì)胞在增殖的同時(shí)還需要保持細(xì)胞間的緊密連接以阻止某些物質(zhì)到達(dá)腦組織。
早期的研究通過(guò)調(diào)節(jié)胞外基質(zhì)面積來(lái)調(diào)節(jié)細(xì)胞的鋪展程度（即細(xì)胞與基底的連接）。結(jié)果表明，細(xì)胞只有在鋪展的時(shí)候才可以增殖[24]。然而，基質(zhì)濃度的變化同時(shí)刺激了整合素連接的胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，細(xì)胞增殖是否僅由鋪展引起仍是未知。圖案化技術(shù)可幫助實(shí)現(xiàn)獨(dú)立控制細(xì)胞鋪展面積及細(xì)胞與基底的接觸面積。利用微接觸印刷技術(shù)在基底上做不連續(xù)的小圖案，通過(guò)調(diào)節(jié)圖案間的距離，可以改變細(xì)胞的鋪展面積而保持細(xì)胞的粘附總面積基本不變。該項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞的鋪展面積，而非細(xì)胞的粘附總面積，是細(xì)胞增殖期與靜止期轉(zhuǎn)換的重要因素[20]。
本研究組將細(xì)胞圖案化應(yīng)用于細(xì)胞遷移的研究中[25]，用電化學(xué)的方法脫附SAMs，可使已經(jīng)圖案化的細(xì)胞在表面自由移動(dòng)（圖 3）。用 μCP 或微流控的方法將細(xì)胞進(jìn)行表面圖案化，圖案化的表面有兩部分組成，一部分是末端連接聚乙二醇 (polyethylene glycol，PEG) 的 SAMs 構(gòu)成的惰性表面，用于抗細(xì)胞粘附；另一部分是可粘附細(xì)胞的纖維蛋白（見(jiàn)2.2.1）。通過(guò)電化學(xué)反應(yīng)，末端連接 PEG 的巰基從金表面脫吸附離去，細(xì)胞便可以在原來(lái)的惰性表面粘附和遷移。
利用該方法可研究細(xì)胞形狀的不對(duì)稱(chēng)性和遷移方向之間的關(guān)系。在細(xì)胞已經(jīng)形成圖案時(shí) (t=0) 使用電化學(xué)法脫附，COS7 細(xì)胞沿不對(duì)稱(chēng)圖形的鈍端遷移(虛線作為細(xì)胞定位的參照)[26]。在此基礎(chǔ)上，再利用微流控的方法可形成濃度梯度[27，28]，有利于研究細(xì)胞在被誘導(dǎo)狀態(tài)下的遷移。研究表明，高爾基體、中心體以及細(xì)胞核等細(xì)胞器的相對(duì)位置的關(guān)系會(huì)影響細(xì)胞的急性和遷移方向[29，30]。
能夠改變表面分子末端官能團(tuán)的化學(xué)方法也可以動(dòng)態(tài)控制細(xì)胞在表面的粘附。當(dāng)對(duì)苯二酚或其衍生物作為 SAMs 分子的末端時(shí)[31～33]，電化學(xué)可使其發(fā)生氧化反應(yīng)。反應(yīng)得到的結(jié)構(gòu)是可以在表面上促進(jìn)細(xì)胞粘附的基團(tuán)，從而使本來(lái)不能粘附細(xì)胞的表面變得可以粘附細(xì)胞，進(jìn)而控制細(xì)胞在表面的粘附和遷移。這些小分子的表面化學(xué)性質(zhì)已成為控制細(xì)胞的粘附和遷移的有效技術(shù)[34]本研究組使用紫外光使偶氮苯在SAMs表面上可逆地展示其RGD配體，實(shí)現(xiàn)了可逆地控制細(xì)胞的粉附[35]。
3.2 組織工程
組織并不是單一細(xì)胞的簡(jiǎn)單堆積，而是多種細(xì)胞有機(jī)結(jié)合的完整功能體。細(xì)胞與細(xì)胞之間的相互作用是研究組織工程的一個(gè)關(guān)鍵問(wèn)題，如脈管系統(tǒng)（平滑肌細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞） 、骨骼?。▎魏顺杉〖?xì)胞和末梢神經(jīng)）以及肝臟（肝細(xì)胞和竇狀小管內(nèi)皮細(xì)胞）中都存在眾多細(xì)胞之間的相互作用。傳統(tǒng)的共培養(yǎng)體系不能將不同種類(lèi)的細(xì)胞控制在同一基底培養(yǎng)，使得關(guān)于細(xì)胞相互作用的研究變得很困難。多種細(xì)胞圖案化的共培養(yǎng)體系是研究組織模型中細(xì)胞間相互作用的良好平臺(tái)。1997年，Bhatia等［36］首次利用細(xì)胞圖形化技術(shù)來(lái)改變肝細(xì)胞和纖維原細(xì)胞的直接接觸位點(diǎn)，證明在該培養(yǎng)體系中肝細(xì)胞和纖維原細(xì)胞直接接觸的點(diǎn)越多，肝細(xì)胞越能夠維持其正常的表現(xiàn)型。
電化學(xué)與微流控相結(jié)合可以把多種細(xì)胞固定在表面。這樣不僅可在時(shí)間和空間上控制細(xì)胞的粘附和脫附，更能精確的控制細(xì)胞之間的距離（圖5）。如圖5所示，中間的條帶是 NIH3T3細(xì)胞，兩側(cè)的條帶是Hela 細(xì)胞，運(yùn)用1.2 V陰極電壓電解脫附30 s后，所有細(xì)胞便可自由地在表面移動(dòng)。這種方法可以研究同一表面上多種細(xì)胞的動(dòng)態(tài)行為和相互作用[37]。
上述通過(guò)操縱空間位置來(lái)調(diào)控多細(xì)胞體系的方法在體外組織重建等領(lǐng)域中有廣闊的應(yīng)用前景，例如肝臟、皮膚、血管、肌肉以及其它組織。體外模擬體內(nèi)研究的最終目的是可以應(yīng)用于組織工程，但是若把上述體系移植入體內(nèi)還存在一定的障礙。大多數(shù)的細(xì)胞圖案化技術(shù)都是以硅、金或玻璃為基底，若使細(xì)胞從基底上脫附并且維持原有的結(jié)構(gòu)還是一個(gè)較大的技術(shù)難題。于是，科研人員開(kāi)始了以生物材料為基底的細(xì)胞圖案化研究[38，39]，以求基底可以在體內(nèi)直接降解。殼聚糖和明膠具有較高的生物相容性，并在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域已經(jīng)有了廣泛的應(yīng)用。研究證明，在殼聚糖和明膠膜上可以進(jìn)行人微血管內(nèi)皮細(xì)胞的圖案化。將纖維原細(xì)胞和人微血管內(nèi)皮細(xì)胞在殼聚糖基底上圖案化以后，共培養(yǎng)會(huì)產(chǎn)生毛細(xì)管狀的結(jié)構(gòu)[40]。
綜上所述，細(xì)胞圖案化在組織工程中已有廣泛的應(yīng)用。然而現(xiàn)階段的問(wèn)題是：如何將二維平面的實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)轉(zhuǎn)變?yōu)槿S的組織結(jié)構(gòu)；如何將組織中的幾種細(xì)胞以最佳的數(shù)量和位置關(guān)系在體外共培養(yǎng)；更重要的是獲得了具有特殊結(jié)構(gòu)的細(xì)胞后，它能否行使組織功能[41]。
3.3 基于細(xì)胞的生物傳感器
細(xì)胞作為細(xì)胞生物傳感器最基本的感應(yīng)單元，能夠表達(dá)一系列潛在的分子識(shí)別元件，例如受體、信號(hào)分子和酶，并且它們?cè)诩?xì)胞內(nèi)處于“自然態(tài)（native state）”[42]。在不破壞細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)的狀況下，可以用生化和物理技術(shù)對(duì)活細(xì)胞的生活狀態(tài)、代謝過(guò)程及信號(hào)通路等進(jìn)行定性和定量的分析，甚至研究其動(dòng)態(tài)變化。蛋白質(zhì)作為大多數(shù)分子傳感器的感應(yīng)單元，其穩(wěn)定性和親和力易受微環(huán)境變化的影響，如酸堿度等；而細(xì)胞本身可以為被檢測(cè)分子提供一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的環(huán)境。細(xì)胞傳感器保持了分子傳感器高通量的優(yōu)點(diǎn)，而相對(duì)于復(fù)雜的動(dòng)物活體分析它又能夠快速檢測(cè)。
圖案化技術(shù)可以將細(xì)胞固定在二維表面形成微陣列，直接研究單細(xì)胞的行為（如通過(guò)細(xì)胞內(nèi)的Ca2+含量變化研究細(xì)胞對(duì)刺激的反應(yīng)）[43]。在眾多的細(xì)胞類(lèi)型中，神經(jīng)細(xì)胞、心肌細(xì)胞等能夠感受電刺激的細(xì)胞被廣泛應(yīng)用在細(xì)胞傳感器中的感應(yīng)單元，因這些細(xì)胞的生理狀態(tài)可以用微電極直接監(jiān)控。對(duì)于神經(jīng)細(xì)胞來(lái)說(shuō)，環(huán)境中化學(xué)信號(hào)的改變會(huì)引起膜電位的變化。因此，神經(jīng)元經(jīng)常被用于藥物檢測(cè)、毒性檢測(cè)以及探測(cè)氣味物質(zhì)[44]。早期的研究為了檢測(cè)到這些信號(hào)，以極高的密度接種細(xì)胞使細(xì)胞覆蓋在微電極上的概率增加，但這樣也增大了測(cè)量誤差。現(xiàn)在圖案化技術(shù)可以更精確的定位細(xì)胞，用微接觸印刷在微電極陣列表面固定多聚賴(lài)氨酸，神經(jīng)元細(xì)胞就會(huì)粘附在微電極陣列上[45]。
細(xì)胞微陣列現(xiàn)已經(jīng)成為檢測(cè)細(xì)胞對(duì)于藥物篩選[46]、抗體檢測(cè)[47]及RNAi 轉(zhuǎn)染[48]的一種重要工具，以其高通量、節(jié)約試劑等優(yōu)點(diǎn)被廣泛關(guān)注。但是仍存在許多復(fù)雜的問(wèn)題，如細(xì)胞類(lèi)型的選擇、細(xì)胞活性的保持以及傳感器的微型化和便攜化等。隨著檢測(cè)手段[49]和軟件的發(fā)展，實(shí)時(shí)、持續(xù)和快速的細(xì)胞傳感器檢測(cè)將具有更廣闊的應(yīng)用前景。4 總結(jié)與展望
二維細(xì)胞圖案化在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。然而，相對(duì)于細(xì)胞在體內(nèi)微環(huán)境平面結(jié)構(gòu)仍然比較簡(jiǎn)單。微流控技術(shù)和3D細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)[50]與細(xì)胞圖案化結(jié)合，將能更加精細(xì)地調(diào)節(jié)細(xì)胞微環(huán)境（基質(zhì)、信號(hào)分子等），實(shí)現(xiàn)更大程度的體內(nèi)模擬。隨著微尺度水平制備技術(shù)的發(fā)展，以及它與傳統(tǒng)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)方法的結(jié)合，二維平面細(xì)胞圖案化技術(shù)將為全方位控制細(xì)胞的行為提供更多的發(fā)展空間。
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近日，北京朝陽(yáng)區(qū)人民法院受理了原告楊某訴被告北京華爾街英語(yǔ)培訓(xùn)中心有限公司、北京康培研修學(xué)院服務(wù)合同糾紛一案。
原告訴稱(chēng)：2002年7月22日，原告和由二被告共同舉辦的華爾街英語(yǔ)中心簽訂《華爾街英語(yǔ)課程注冊(cè)合同》，約定由中心在2002年7月22日至2004年4月22日共21個(gè)月的期限內(nèi)，提供七級(jí)固定課程級(jí)別的英語(yǔ)培訓(xùn)服務(wù)，學(xué)費(fèi)為25380元。被告還以當(dāng)年7月和8月期間所學(xué)的整級(jí)課程免費(fèi)作為優(yōu)惠措施。合同簽訂后，原告以現(xiàn)金方式一次性支付了全部學(xué)費(fèi)，并在被告處開(kāi)始學(xué)習(xí)。但在原告學(xué)習(xí)期間，被告未能完全提供其承諾的教學(xué)服務(wù)內(nèi)容，且教學(xué)服務(wù)質(zhì)量下降，導(dǎo)致原告的學(xué)習(xí)進(jìn)度嚴(yán)重滯后，僅完成除免費(fèi)課程外的三級(jí)課程的教學(xué)進(jìn)度，尚余四級(jí)課程沒(méi)有完成。
現(xiàn)原告認(rèn)為被告未能提供合同約定的教學(xué)服務(wù)，使原告在付出了高昂的學(xué)費(fèi)和大量時(shí)間后，仍未能實(shí)現(xiàn)預(yù)定的學(xué)習(xí)計(jì)劃，對(duì)原告的金錢(qián)和時(shí)間造成了巨大浪費(fèi)。故訴至法院，要求被告退還已收取的學(xué)費(fèi)14502.86元。
一、一體化教學(xué)與一體化教師之間的矛盾
一體化教學(xué)要求教師必須是既能上好理論課又能帶好實(shí)訓(xùn)課的雙師型教師。技工學(xué)校傳統(tǒng)教學(xué)模式遺留下來(lái)的師資問(wèn)題是：理論課教師不適應(yīng)實(shí)習(xí)課教學(xué)，實(shí)習(xí)指導(dǎo)教師不適應(yīng)理論課教學(xué)，可以把他們組合在一起進(jìn)行一體化教學(xué)，使他們能夠在一起互相學(xué)習(xí)，共同提高。新教師可以和老教師組合在一起以主副講的形式進(jìn)行一體化教學(xué)，以老帶新；教師之間互相聽(tīng)課，加強(qiáng)學(xué)習(xí)，自我提高；還可以采取送教師外出培訓(xùn)、外聘稱(chēng)職老師、聘請(qǐng)專(zhuān)家講學(xué)等多種手段加強(qiáng)雙師型教師隊(duì)伍建設(shè)。按照技工學(xué)校培養(yǎng)中級(jí)技術(shù)工人的目標(biāo)，最基本的要求是：在2至3年內(nèi)，原來(lái)的理論課教師在操作技能方面要達(dá)到高級(jí)工的水平，原來(lái)的實(shí)習(xí)指導(dǎo)教師在理論素養(yǎng)方面要能講請(qǐng)汽車(chē)各部件的功用、原理和構(gòu)造，達(dá)到助理講師的水平，所有汽車(chē)專(zhuān)業(yè)的教師都應(yīng)該能夠獨(dú)立勝任一體化教學(xué)任務(wù)。
二、一體化教學(xué)與一體化教室之間的矛盾
一體化教學(xué)要求師生雙方共同在專(zhuān)業(yè)實(shí)訓(xùn)場(chǎng)地圍繞工作任務(wù)進(jìn)行邊教、邊學(xué)、邊做來(lái)完成教學(xué)任務(wù)，既教室、實(shí)訓(xùn)場(chǎng)地、實(shí)訓(xùn)工具設(shè)備等設(shè)施一體化。我校的基礎(chǔ)比較薄弱，設(shè)備陳舊、工位嚴(yán)重不足，汽車(chē)維修實(shí)訓(xùn)場(chǎng)地面積不到800m2，無(wú)法展開(kāi)一體化教學(xué)。我校爭(zhēng)取政府職教扶持資金、銀行貸款、職工借資等多渠道籌集資金，投入近600萬(wàn)元建實(shí)訓(xùn)樓，新增有效實(shí)訓(xùn)場(chǎng)地面積超過(guò)3000m2，添置了整車(chē)，電控汽油、柴油發(fā)動(dòng)機(jī)臺(tái)架、自動(dòng)變速器臺(tái)架、ABS試驗(yàn)臺(tái)架、汽車(chē)電氣試驗(yàn)臺(tái)架、四輪定位儀、汽車(chē)舉升機(jī)、數(shù)字診斷儀等一大批實(shí)訓(xùn)設(shè)備，將桌椅搬到實(shí)訓(xùn)車(chē)間，在車(chē)間布置黑板、四周貼上掛圖、安裝投影機(jī)、安裝無(wú)線局域網(wǎng)，給一體化教師配備筆記本電腦，一體化設(shè)施的建設(shè)基本完成，完全能夠滿足開(kāi)展一體化教學(xué)的硬件要求。
三、一體化教學(xué)與一體化教材之間的矛盾
一體化教學(xué)的基本框架是“專(zhuān)業(yè)模塊課題（或項(xiàng)目）任務(wù)”，把專(zhuān)業(yè)教師分配到各個(gè)模塊中進(jìn)行一體化教學(xué)，學(xué)生輪訓(xùn)完所有的模塊就完成了一體化教學(xué)，之后是進(jìn)行國(guó)家技能鑒定（等級(jí)考試）和校外實(shí)習(xí)。
一體化教學(xué)要求配套與模塊教學(xué)內(nèi)容相一致的、圍繞工作任務(wù)為中心的、理論與實(shí)訓(xùn)相統(tǒng)一的一體化教材。由于各校的模塊劃分不同，實(shí)訓(xùn)的車(chē)型、機(jī)型和設(shè)備不同，因此不可能有放之四海皆適用的一體化教材，我們至今就找不到完全適合我校使用的一體化教材，曾經(jīng)使用過(guò)的一些職業(yè)院校編寫(xiě)的教材，模塊劃分與我校不同，理論過(guò)深過(guò)多而實(shí)訓(xùn)內(nèi)容不足，而且教材中實(shí)訓(xùn)使用的車(chē)型、機(jī)型和設(shè)備與我校不同，這些內(nèi)容也是廢的。組織專(zhuān)業(yè)教師研究和開(kāi)發(fā)課題、制定教學(xué)計(jì)劃、編寫(xiě)教學(xué)方案，進(jìn)一步編寫(xiě)適合于本校使用的一體化教材是一個(gè)好辦法。
編寫(xiě)本校模塊式一體化教材的注意事項(xiàng)主要有以下幾方面：
（一）理論知識(shí)以“必須、夠用”為準(zhǔn)，一些陳舊的內(nèi)容或深?yuàn)W的理論知識(shí)可以大膽刪除。
（二）一體化教材應(yīng)體現(xiàn)以“能力培養(yǎng)”為中心，時(shí)間分配上，理論與實(shí)訓(xùn)的課時(shí)比例要達(dá)到4:6，有的項(xiàng)目甚至要達(dá)到3:7。實(shí)訓(xùn)操作項(xiàng)目以實(shí)際職業(yè)工作任務(wù)來(lái)制訂，與國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)接軌，強(qiáng)調(diào)規(guī)范、安全操作。突出訓(xùn)練學(xué)生的協(xié)作能力、應(yīng)用所學(xué)知識(shí)分析問(wèn)題與解決問(wèn)題的能力以及熟練的操作技能等。
（三）各個(gè)實(shí)訓(xùn)項(xiàng)目應(yīng)以本校的車(chē)型、機(jī)型和設(shè)備或創(chuàng)造條件能夠配備的硬件為基礎(chǔ)，充分挖掘本校的硬件資源開(kāi)發(fā)實(shí)訓(xùn)項(xiàng)目，使學(xué)生練熟、練透形成技能，并在此基礎(chǔ)上舉一反三，達(dá)到觸類(lèi)旁通、進(jìn)一步掌握其他車(chē)型和機(jī)型的目的。
（四）與各個(gè)實(shí)訓(xùn)項(xiàng)目相關(guān)的理論知識(shí)部分，均應(yīng)編制習(xí)題，在開(kāi)展實(shí)訓(xùn)項(xiàng)目練習(xí)的同時(shí)進(jìn)行理論知識(shí)的考核，既能夠避免由于實(shí)訓(xùn)工位不足不得不讓學(xué)生放羊的現(xiàn)象，又達(dá)到鞏固所學(xué)理論知識(shí)的目的。
（五）一體化教材應(yīng)不斷與教學(xué)設(shè)備同步更新。學(xué)校要?jiǎng)?chuàng)造條件加強(qiáng)硬件建設(shè)與師資培訓(xùn)并及時(shí)更新教材，這樣才能使學(xué)生滿足社會(huì)需要，跟上時(shí)展步伐。
四、一體化教學(xué)與一體化教法之間的矛盾
一體化教學(xué)是將理論教學(xué)與實(shí)訓(xùn)教學(xué)合二為一的一種教學(xué)模式，現(xiàn)有的一體化教師原來(lái)上理論課的不熟悉實(shí)訓(xùn)課教學(xué)、原來(lái)帶實(shí)訓(xùn)課的師傅不能上理論課，因此教師必須經(jīng)過(guò)一段時(shí)間的探索和實(shí)踐，才能成為一名合格的一體化教師。一體化教學(xué)需要教師在熟悉傳統(tǒng)的理論課教法和實(shí)訓(xùn)課教法的基礎(chǔ)上將二者合而為一，不斷總結(jié)教學(xué)經(jīng)驗(yàn)和學(xué)習(xí)新的教學(xué)方法，實(shí)現(xiàn)教學(xué)創(chuàng)新，形成自己的教學(xué)風(fēng)格。只有這樣，教師才能夠針對(duì)不同教學(xué)內(nèi)容，靈活運(yùn)用各種方法進(jìn)行一體化教學(xué)，達(dá)到最佳的教學(xué)效果。
（一）一體化教師要做好教學(xué)準(zhǔn)備。
一是學(xué)期初編寫(xiě)好教學(xué)進(jìn)度計(jì)劃。這一工作的核心在于教師要根據(jù)本校的實(shí)際情況，充分挖掘設(shè)備潛力，開(kāi)發(fā)課題與項(xiàng)目，真正讓學(xué)生有事可做。
二是上課前制定好教學(xué)方案。這一工作的主要內(nèi)容是上課前教師必須把上課需用的教具、設(shè)備、工具及教學(xué)軟件準(zhǔn)備好，并編寫(xiě)好教案和課件。
（二）一體化教師要做好一名導(dǎo)演。
一體化教師要充分發(fā)揮主導(dǎo)作用，調(diào)動(dòng)一切教學(xué)資源為教學(xué)服務(wù)。技工學(xué)校的生源素質(zhì)普遍較低，理解能力與接受能力都很差，教師應(yīng)盡可能采用實(shí)物、掛圖、模型等直觀手段并穿插運(yùn)用動(dòng)畫(huà)、視頻等多媒體手段施教。學(xué)生的注意力很難保持超過(guò)15分鐘的高度集中，長(zhǎng)時(shí)間的理論講解或長(zhǎng)時(shí)間的播放視頻效果都不好，板書(shū)、實(shí)物、投影等交替使用，可以使學(xué)生轉(zhuǎn)移注意力，提高學(xué)習(xí)興趣、保持興奮狀態(tài)，才能收到更好的效果。
（三）一體化教師要做好示范操作。
教師的示范操作是實(shí)訓(xùn)教學(xué)的一個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié)，要求一體化教師既要有熟練的動(dòng)手能力又要有深厚的理論功底，不能只做不講，或只播放視頻而不動(dòng)手操作。教師在做的同時(shí)，要講清動(dòng)作要領(lǐng)、技術(shù)要求和注意事項(xiàng)，還可以提出問(wèn)題，引導(dǎo)學(xué)生思考和討論，驗(yàn)證和鞏固所學(xué)的理論知識(shí)，使理論與實(shí)踐緊密結(jié)合起來(lái)。問(wèn)題在于，一名教師要面對(duì)整個(gè)班級(jí)的學(xué)生，最多只能保證前面的8至12名學(xué)生看得清楚，如何解決這一矛盾？方法有兩個(gè)：
一是退一步，不要求所有的學(xué)生一次性掌握所有操作要領(lǐng)。教師可以先重點(diǎn)教會(huì)幾名“徒弟”作為助手，在后面的分組實(shí)訓(xùn)中這幾名助手又作為“師傅”教會(huì)其他學(xué)生，這些助手有了成就感，能夠增強(qiáng)他們的興趣和信心，往后的學(xué)習(xí)和訓(xùn)練會(huì)更加積極和主動(dòng)。同學(xué)之間的交流比學(xué)生與老師之間的交流更為容易也更為隨意，他們更愿意請(qǐng)教其他同學(xué)或者與其他同學(xué)討論而不好意思請(qǐng)教老師，因?yàn)檎?qǐng)教老師就意味著自己笨，心理上有低人一等的失敗感。這種退一步的做法也從另一方面培養(yǎng)了學(xué)生團(tuán)結(jié)協(xié)作的精神。
二是進(jìn)一步，教師辛苦一些，事先用攝像機(jī)或數(shù)碼相機(jī)拍下整個(gè)操作過(guò)程的視頻或圖片，邊操作邊講解，同時(shí)輔以視頻和圖片的投影，讓全班同學(xué)都可以看清楚每一個(gè)操作的細(xì)節(jié)。
實(shí)踐證明，這兩種方法結(jié)合在一起使用，效果會(huì)更好。
（四）一體化教師要做好巡回指導(dǎo)。
巡回指導(dǎo)是實(shí)訓(xùn)教學(xué)中的一個(gè)重要環(huán)節(jié)，要求教師下到實(shí)訓(xùn)的學(xué)生中間，對(duì)學(xué)生操作的全過(guò)程進(jìn)行有效監(jiān)控，及時(shí)發(fā)現(xiàn)問(wèn)題并加以糾正，這個(gè)環(huán)節(jié)也是教師針對(duì)程度不同的學(xué)生做到因材施教的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。這個(gè)環(huán)節(jié)教師要重點(diǎn)抓好兩件事：
一是教師要當(dāng)好一名伯樂(lè)。技校學(xué)生雖然學(xué)習(xí)基礎(chǔ)較差，但大都樂(lè)于動(dòng)手，教師應(yīng)當(dāng)善于發(fā)現(xiàn)那些接受能力好、動(dòng)手能力強(qiáng)的學(xué)生并加以重點(diǎn)指導(dǎo)，把他們培養(yǎng)成教師的助手，再通過(guò)他們?nèi)ブ笇?dǎo)和幫助其他同學(xué)，否則一名教師要想帶好全班四、五十名甚至六十名學(xué)生，就是給你三頭六臂你也忙不過(guò)來(lái)。
二是教師要當(dāng)好一名師傅。學(xué)生個(gè)體的智力與非智力因素存在差異性，對(duì)一些接受能力與動(dòng)手能力相對(duì)較差的學(xué)生，教師不能放棄，要督促他們，像師傅一樣一對(duì)一的手把手地教他們做，并分配更多時(shí)間讓他們練習(xí)。
實(shí)踐證明，這種抓兩頭帶中間的方法，可以有效達(dá)到全班學(xué)習(xí)齊頭并進(jìn)的良好效果。
（五）一體化教師要做好課堂管理。
技工學(xué)校的一個(gè)普遍現(xiàn)象是：汽修專(zhuān)業(yè)實(shí)習(xí)課“放羊”現(xiàn)象比較嚴(yán)重。由于汽修實(shí)訓(xùn)需要的場(chǎng)地大、設(shè)備貴，不可能象鉗工專(zhuān)業(yè)那樣保證每生一個(gè)工位，這樣一部分學(xué)生進(jìn)行實(shí)操訓(xùn)練的同時(shí)另一部分學(xué)生就無(wú)事可做。如何避免這一現(xiàn)象的發(fā)生？
一是做好課堂組織工作。這一工作的核心是給學(xué)生創(chuàng)造更多的練習(xí)機(jī)會(huì)以利于形成技能。方法是進(jìn)行分組訓(xùn)練。分組應(yīng)根據(jù)本校的場(chǎng)地、設(shè)備與工量具的實(shí)際情況而定，一般應(yīng)分成4至8組，每組4至10名學(xué)生。分組越多，每組人數(shù)越少，則學(xué)生輪訓(xùn)的周期短，每個(gè)學(xué)生可以獲得更多的練習(xí)機(jī)會(huì)，對(duì)技能的形成有好處，但對(duì)場(chǎng)地與設(shè)備的要求也越高；分組越少，每組人數(shù)越多，則學(xué)生輪訓(xùn)的周期長(zhǎng)，每個(gè)學(xué)生獲得練習(xí)的機(jī)會(huì)就越少，而且先做完的學(xué)生如果無(wú)事可做，就容易發(fā)生“放羊”現(xiàn)象，解決這個(gè)問(wèn)題的方法就是安排先做完的學(xué)生再回過(guò)頭去練習(xí)以前做過(guò)的項(xiàng)目，因?yàn)橹挥薪?jīng)過(guò)多次的反復(fù)練習(xí)才能熟練掌握操作要領(lǐng)，最后達(dá)到精通的程度，形成能夠完成一定任務(wù)的習(xí)慣性、職業(yè)性的一整套規(guī)范動(dòng)作，從而獲得技能。
二是用好“考試”這個(gè)法寶。這一工作的核心是通過(guò)考試的手段來(lái)有效地推動(dòng)學(xué)生學(xué)習(xí)，好的成績(jī)也是對(duì)學(xué)習(xí)努力的學(xué)生的一種成功肯定，會(huì)促使他們更努力學(xué)習(xí)。實(shí)踐證明，盡管教師采用了多種手段來(lái)激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣，但還是有部分學(xué)生不夠主動(dòng)，懶于動(dòng)手。既然通過(guò)“內(nèi)因”的手段不行，那我們就有必要通過(guò)“外因”的手段去推動(dòng)他們學(xué)習(xí)。為了達(dá)到最好的效果，就有必要打破過(guò)去那種期末考試一錘定音的考試模式。具體做法是：每一個(gè)任務(wù)都進(jìn)行考核，分知識(shí)問(wèn)答、實(shí)習(xí)操作、實(shí)習(xí)報(bào)告三項(xiàng)，每項(xiàng)均記錄成績(jī)，本模塊學(xué)習(xí)結(jié)束時(shí)全部幾十個(gè)項(xiàng)目的成績(jī)總和除以考核次數(shù)（請(qǐng)假缺考不計(jì)次數(shù)，而曠課缺考計(jì)次數(shù)）計(jì)算出分?jǐn)?shù)后，再按學(xué)生的課堂紀(jì)律與出勤情況進(jìn)行適當(dāng)?shù)募訙p，最后得出的分?jǐn)?shù)即為學(xué)生的實(shí)訓(xùn)成績(jī)，如果學(xué)生對(duì)自己某項(xiàng)成績(jī)不滿意，可以隨時(shí)進(jìn)行補(bǔ)考，以最好那次成績(jī)記分。這種做法可以促使沒(méi)有輪到考核（包括理論與實(shí)習(xí)）的學(xué)生主動(dòng)復(fù)習(xí)鞏固所學(xué)知識(shí)與主動(dòng)觀摩別人的實(shí)習(xí)操作，與其他同學(xué)討論問(wèn)題的答案與操作技巧；考完的學(xué)生則寫(xiě)實(shí)習(xí)報(bào)告，或者對(duì)以前的項(xiàng)目成績(jī)不滿意的可以回過(guò)頭去練習(xí)然后再補(bǔ)考。這樣就在很大程度上避免了課堂上的“放羊”現(xiàn)象。但是這種做法工作量很大，因此教師應(yīng)該善于發(fā)現(xiàn)和培養(yǎng)積極和能干的學(xué)生來(lái)當(dāng)“考官”，整個(gè)過(guò)程教師只需做好監(jiān)控與巡回指導(dǎo)工作就行了，讓學(xué)生自己學(xué)習(xí)討論、互相評(píng)價(jià)與開(kāi)展競(jìng)賽，充分發(fā)揮學(xué)生學(xué)習(xí)的主體作用。
（六）一體化教師要做好附屬工作。
一體化教學(xué)管理比常規(guī)的課堂管理要困難得多，管理的內(nèi)容也豐富得多。我們?cè)谝惑w化教學(xué)中應(yīng)引入企業(yè)的“6S”活動(dòng)管理理念，以培養(yǎng)學(xué)生形成規(guī)范、安全、文明的操作習(xí)慣。“6S”活動(dòng)指的是：整理（Seiri）；整頓（Seition）；清掃（Seiso）；清潔（Seilets）；素養(yǎng)（Shitsuke）；安全（Security）。
五、結(jié)束語(yǔ)
一體化教學(xué)是適合我國(guó)目前職業(yè)教育國(guó)情的一種教學(xué)模式，但不是終極的完美模式，隨著形勢(shì)的發(fā)展，今后可能會(huì)過(guò)渡到更好的類(lèi)似于德國(guó)雙元制的模式。任何事物都存在著矛盾，并在解決矛盾的過(guò)程中向前發(fā)展，一體化教學(xué)作為過(guò)渡階段出現(xiàn)的新生事物也是如此，我們?cè)诮鉀Q一體化教學(xué)各方面矛盾的同時(shí)就會(huì)推進(jìn)職業(yè)教育的質(zhì)量向更高的階段發(fā)展，為區(qū)域經(jīng)濟(jì)作出自己應(yīng)有的貢獻(xiàn)。
中圖分類(lèi)號(hào)：O6-33 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A
隨著國(guó)民教育的快速發(fā)展，各類(lèi)學(xué)校的實(shí)驗(yàn)室教學(xué)、科研活動(dòng)愈加頻繁，實(shí)驗(yàn)室廢氣、廢液、固體廢棄物等的排放及其污染問(wèn)題日益突出。①②③④尤其是化學(xué)實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生的污染更為嚴(yán)重，反應(yīng)常常會(huì)伴有有毒有害氣體產(chǎn)生并逸出。如在有機(jī)化學(xué)實(shí)驗(yàn)正溴丁烷的制備中，反應(yīng)物HBr氣體有毒有害且難以冷凝，容易逃逸出反應(yīng)裝置造成環(huán)境污染。為防止HBr的污染，常需要安裝尾氣吸收裝置。但由于傳統(tǒng)吸收裝置設(shè)計(jì)上的缺陷，常出現(xiàn)吸收不完全，廢氣外逸，吸收液倒吸等現(xiàn)象。因此，在化學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中有必要進(jìn)行實(shí)驗(yàn)儀器的改進(jìn)。這里特別設(shè)計(jì)了一種結(jié)構(gòu)合理、效果良好的氣體吸收裝置。
1 現(xiàn)有氣體吸收裝置的分析
目前普遍使用的氣體吸收裝置如圖1的右下部分所示，采用的方法是通過(guò)反應(yīng)裝置上的回流冷凝管連接一導(dǎo)氣軟管，導(dǎo)氣軟管另一端連接一個(gè)玻璃漏斗。玻璃漏斗略微傾斜，漏斗口一半浸沒(méi)在水面下，一半露出在水面上以達(dá)到既能吸收廢氣又能防止水流倒吸的效果。⑤⑥⑦然而傳統(tǒng)氣體吸收裝置存在以下缺點(diǎn)：（1）液封效果不好，吸收氣體時(shí)，液面波動(dòng)，氣體容易逸出。（2）漏斗不易固定，經(jīng)常會(huì)整個(gè)浸入水面，導(dǎo)致液體倒吸至反應(yīng)瓶。（3）當(dāng)反應(yīng)過(guò)程中有大量氣體生成或氣體逸出很快時(shí)，會(huì)導(dǎo)致裝置來(lái)不及充分吸收而使得有毒有害氣體逸散到空氣中。
為了克服傳統(tǒng)吸收裝置中漏斗不易固定，氣體容易逸出、吸收效果不佳的問(wèn)題。黃福祥、朱池平等進(jìn)行了儀器的改進(jìn)：固定倒置漏斗或長(zhǎng)導(dǎo)管稍伸入水面下，與水面形成液封，設(shè)計(jì)氣體由另一導(dǎo)管進(jìn)入且不與水面接觸，當(dāng)瓶?jī)?nèi)氣壓因氣體溶解而減小時(shí)，由于漏斗或長(zhǎng)導(dǎo)管的平衡內(nèi)、外氣壓作用，不會(huì)形成吸收液體的倒吸。⑧⑨宋學(xué)軍、趙桂貞等報(bào)道設(shè)計(jì)了一種由三通管連通的氣體吸收裝置。該裝置設(shè)計(jì)了安全輔助裝置，通過(guò)水位升降來(lái)調(diào)節(jié)氣體流向。⑩以上裝置基本能有效吸收有害氣體，并能起到防止倒吸的現(xiàn)象。但也存在一定的缺陷：如吸收形態(tài)固定、吸收容量有限；又如當(dāng)反應(yīng)過(guò)程中有大量氣體生成或氣體很快逸出時(shí)，仍會(huì)導(dǎo)致氣體來(lái)不及被充分吸收而逃逸出裝置。目前，化學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中還沒(méi)有一種操作方便、吸收容量大、效果良好，適用范圍廣，能有效防止水流倒吸的實(shí)驗(yàn)尾氣吸收裝置。
2 氣體吸收裝置的改進(jìn)
針對(duì)現(xiàn)有實(shí)驗(yàn)尾氣吸收裝置存在的不足之處，特設(shè)計(jì)了如圖2所示的一種新穎裝置，可使得廢氣被充分吸收并且能有效防止水流倒吸。其操作簡(jiǎn)便、安全可靠、效果顯著，可廣泛應(yīng)用于學(xué)生實(shí)驗(yàn)。
圖2所示的瓶體1的上端一體設(shè)置有進(jìn)水管2和進(jìn)氣管3，瓶體1內(nèi)固定設(shè)置有內(nèi)管4，進(jìn)水管2和進(jìn)氣管3分別與內(nèi)管4的上端相連通，內(nèi)管4的下端開(kāi)口，瓶體1的側(cè)壁上設(shè)置有出水口5，內(nèi)管4的下端略低于出水口5。圖3即為該吸收裝置與反應(yīng)裝置一起使用的狀態(tài)示意圖。
該裝置的特點(diǎn)是由于瓶體的上端設(shè)置有進(jìn)水管和進(jìn)氣管，因此可利用反應(yīng)裝置上回流冷凝管流出的水進(jìn)入該進(jìn)水管，并與由進(jìn)氣管進(jìn)入的實(shí)驗(yàn)尾氣一起流經(jīng)內(nèi)管至瓶體出水口排出。由于內(nèi)管的下端略低于瓶體上的出水口，使內(nèi)管管口剛好被水面封住，因此吸收裝置的液封效果良好，可將廢氣有效密封并充分吸收。
該裝置的另一優(yōu)點(diǎn)是進(jìn)入瓶體的水流對(duì)廢氣進(jìn)行有效吸收的同時(shí)還源源不斷將溶有廢氣的液體排出出水口，增大了廢氣吸收容量。同時(shí)液體的流動(dòng)阻止了水流的逆流倒吸，有效防止了傳統(tǒng)裝置中水倒吸至反應(yīng)瓶的情況出現(xiàn)。此外，該裝置吸收容量大尤其適用于有大量廢氣生成或氣體逸出激烈等情形使用。
該氣體吸收裝置適用于類(lèi)似正溴丁烷的制備等有尾氣產(chǎn)生的化學(xué)實(shí)驗(yàn)，可提高學(xué)生實(shí)驗(yàn)的安全可操作性和環(huán)保性，可提高實(shí)驗(yàn)教學(xué)效果，具有一定的推廣應(yīng)用價(jià)值。
3 實(shí)驗(yàn)應(yīng)用
將該氣體吸收裝置應(yīng)用于1-溴丁烷的制備：在100mL圓底燒瓶中加入10mL水，并小心地加入14mL濃硫酸，混合均勻后冷至室溫。再依次加入9.2mL正丁醇和13g溴化鈉，充分搖振后加入幾粒沸石。圓底燒瓶上接一回流冷凝管，冷凝管上的出水軟管接入吸收裝置的進(jìn)水管，冷凝管上端的尾氣排出軟管接入吸收裝置的進(jìn)氣管。接通冷凝水后將燒瓶置于石棉網(wǎng)上小火加熱至沸，不斷搖動(dòng)燒瓶，并保持平穩(wěn)回流30～40min。待反應(yīng)完全，冷卻后改為蒸餾裝置，蒸出粗產(chǎn)物。將溜出液轉(zhuǎn)移至分液漏斗中進(jìn)行洗滌。將干燥好的產(chǎn)物過(guò)濾到蒸餾瓶中，加熱蒸餾，收集95～99℃的餾分。實(shí)驗(yàn)結(jié)果獲得約50%的產(chǎn)率。新裝置在使用過(guò)程中容易固定，裝配方便；尾氣隨冷凝水排至下水道，基本無(wú)逸出，更無(wú)水流倒吸現(xiàn)象，實(shí)驗(yàn)環(huán)境亦大為改善。
4 結(jié)束語(yǔ)
該新型氣體吸收裝置結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單合理，克服了傳統(tǒng)裝置存在的缺點(diǎn)，可有效吸收有害廢氣，防止液體倒吸，使用方便、安全，適用于化學(xué)實(shí)驗(yàn)的有害尾氣吸收。
注釋
① 吳偉軍，劉海飛.實(shí)驗(yàn)室環(huán)境污染現(xiàn)狀與防治對(duì)策[J].實(shí)驗(yàn)室研究與探索，2008.27（4）：142-144.
② 孟慶祥.實(shí)驗(yàn)室污染的防治及治理[J].實(shí)驗(yàn)室科學(xué)，2009（6）：161-162.
③ 易國(guó)順，趙邦枝，李名家，等.高校實(shí)驗(yàn)室安全與環(huán)保的現(xiàn)狀分析和對(duì)策研究[J].實(shí)驗(yàn)技術(shù)與管理，2010.27（5）：170-176.
④ 王玉清，薛琳娜.高校實(shí)驗(yàn)室污染的因素及防治對(duì)策[J].實(shí)驗(yàn)室研究與探索，2011.30（6）：417-420.
⑤ 谷珉珉，賈韻儀，姚子鵬.有機(jī)化學(xué)實(shí)驗(yàn)[M].上海：復(fù)旦大學(xué)出版社，1991：174-175.
⑥ 曾昭瓊.有機(jī)化學(xué)實(shí)驗(yàn)（第三版）[M].北京：高等教育出版社，2000：92-93.
⑦ 王清廉，李瀛，高坤，等.有機(jī)化學(xué)實(shí)驗(yàn)（第三版）[M].北京：高等教育出版社，2010：129-130.
The evaluation and risk factors analysis of coronary calcification in maintenance hemodialysis patients
ZHENG Lin hong,HUANG Hui,CHEN Jie,et al. Nephrology department of the People’s Hospital of Zengcheng City,Guangzhou,zencheng 511300,China
【Abstract】 Objective To evaluate and analyze risk factors of coronary calcification in maintenance hemodialysis patients.Methods 40 maintenance hemodialysis patients with coronary artery CT examination from Jan 2003 to Jan 2010 were divided into coronary calcification group(N=26)and non coronary calcification group(N=14).Serum chemical substance and risk factors were compared between two groups.Results The calcium,phosphate,parathyroid hormone,C reactive protein,LDL and CHOL increased in coronary calcification group(P
【Key words】Maintenance Hemodialysis; Vascular Calcification; Coronary artery
隨著血液凈化技術(shù)的日益完善,血液透析患者存活期可達(dá)數(shù)十年,血管鈣化是血液透析患者一個(gè)常見(jiàn)并發(fā)癥,是導(dǎo)致心血管疾病發(fā)生和猝死的重要原因。統(tǒng)計(jì)資料表明,血液透析患者的病死率比年齡匹配普通人群高10~20倍,心血管事件造成的死亡占總死亡原因50%以上,而冠狀動(dòng)脈鈣化是導(dǎo)致心血管事件發(fā)生及死亡的重要原因。冠脈鈣化與心肌梗死和心臟驟停等心血管事件發(fā)生都密切相關(guān),目前被認(rèn)為是重要的心血管事件病死率和總病死率的預(yù)測(cè)因素[1]。本研究對(duì)血液透析患者冠脈鈣化進(jìn)行評(píng)價(jià),并分析其危險(xiǎn)因素,旨在為臨床上篩選出高危的血液透析患者并進(jìn)行干預(yù)積累一定的基礎(chǔ)。
1 材料與方法
1.1 研究對(duì)象 對(duì)我院從2003年1月至2010年1月間血液透析患者167例,排除在進(jìn)入血液透析前已經(jīng)存在心肌梗死病史或嚴(yán)重心律失常的患者,其中有40例進(jìn)行了冠脈CTA檢查。男23例,女17例,平均年齡(35.8±16.7)歲。原發(fā)病為慢性腎炎9例,高血壓性腎硬化10例,糖尿病腎病15例,多囊腎3例,梗阻性腎病,間質(zhì)性腎炎和血管炎各1例。所有患者均接受碳酸氫鹽透析3次/周,4 h/次。使用費(fèi)森尤斯(Fresenius)4008系列透析機(jī)進(jìn)行血液透析,血流量200~250 ml/min,透析液流量500 ml/min。透析器為Freseninus F6(聚砜膜,膜面積1.3 m2)。患者分別使用鈣濃度1.25 mmol/L和1.50 mmol/L透析液。
1.2 測(cè)量與統(tǒng)計(jì)方法
1.2.1 冠脈鈣化的評(píng)價(jià) 螺旋CT檢查:螺旋CT機(jī)為我院CT室東芝Aquilion 64CT及其Vistra軟件,檢查冠狀動(dòng)脈多層螺旋CT,冠脈的鈣化分析通過(guò)兩個(gè)獨(dú)立影像學(xué)主治醫(yī)生或以上者閱片完成,若有爭(zhēng)議,需增加一名更高年資的影像學(xué)專(zhuān)家閱片。
1.2.2 其他指標(biāo)測(cè)定方法 檢測(cè)患者在進(jìn)行CTA檢查時(shí)的血生化結(jié)果,血液透析前血清血鈣、血磷、PTH、膽固醇、低密度脂蛋白(LDL)和超敏CRP等。iPTH測(cè)定采用放免分析法,生化學(xué)指標(biāo)血鈣及膽固醇等均采用全自動(dòng)分析儀(日本OLYMPUSAU 5400)測(cè)定。
1.2.3 其他臨床資料收集 收集所有患者的病史等臨床資料,包括年齡、性別、糖尿病史、吸煙史、低鈣透析與否,透析時(shí)間,分析這些因素與冠脈鈣化之間的關(guān)系。
1.2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 使用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)資料進(jìn)行處理,計(jì)量資料以(x±s)表示,計(jì)數(shù)資料以百分比表示,兩組間對(duì)比采用計(jì)量資料以t檢驗(yàn)方法分析,計(jì)數(shù)資料以χ2檢驗(yàn)方法分析,檢驗(yàn)水準(zhǔn)為雙側(cè)α=0.05,P
2 結(jié)果
2.1 血液透析患者冠脈鈣化與非冠脈鈣化組血生化的比較
在40例入選的血液透析患者中,有26例存在冠脈鈣化,占所進(jìn)行檢查患者的65%,以是否存在冠脈鈣化將入選患者分為冠脈鈣化組和非冠脈鈣化組,比較兩組患者透析前血清血鈣、血磷、PTH、膽固醇、低密度脂蛋白(LDL)和超敏CRP等指標(biāo)。
表1
血液透析患者冠脈鈣化與非冠脈鈣化組
血生化的比較(x±s)
臨床生化項(xiàng)目全組冠脈鈣化組非冠脈鈣化組
例數(shù)402614
血鈣(mmol/L)2.37±0.122.40±0.142.32±0.11
血磷(mmol/L)1.57±0.522.12±0.42*1.37±0.36
鈣磷乘積(mg2/dl2)47.3±12.458.3±11.4*40.5±10.3
PTH(ng/L)183.3±143.7243.4±172.1*154.3±92.4
CRP(mg/L)5.78±1.66.97±1.94*2.58±1.7
LDL(mmol/L)2.35±0.942.93±1.25*1.84±0.78
CHOL(mmol/L)5.43±1.25.78±1.6*4.53±1.3
注:*表明兩組比較,兩者差異P
結(jié)果表明在冠脈鈣化組,其血磷、鈣磷乘積、PTH、CRP、LDL和CHOL均顯著高于非冠脈鈣化組(P
2.2 血液透析患者冠脈鈣化的危險(xiǎn)因素分析 將冠脈鈣化、非冠脈鈣化和全部血液透析患者的年齡、性別、糖尿病史、高血壓史、吸煙史、肥胖、血液透析時(shí)間和低鈣透析等血管鈣化可能危險(xiǎn)因素進(jìn)行比較,結(jié)果見(jiàn)表2。
表2
冠脈鈣化患者病史危險(xiǎn)因素比較
臨床病史項(xiàng)目全組冠脈鈣化組非冠脈鈣化組
例數(shù)402614
年齡35.8±16.741.8±17.8*31.8±8.7
性別(男/女)23/1719/74/10
糖尿病史(%)37.550.0*14.3
高血壓病史(%)9096.278.6
吸煙史(%)27.534.6*14.3
肥胖(%)12.515.4*7.1
血液透析時(shí)間(年)2.4±1.73.5±1.2*1.6±0.8
低鈣透析(%)3011.5*64.3
注:*表明兩組比較,兩者差異P
結(jié)果表明,在冠脈鈣化組的年齡和血液透析時(shí)間均顯著大于非冠脈鈣化組,而具有糖尿病史、吸煙史和肥胖方面的比例均高于非冠脈鈣化組,選擇進(jìn)行了低鈣透析的比例卻明顯低于非冠脈鈣化組。
3 討論
血管鈣化在CKD患者中非常普遍,隨著疾病的進(jìn)展,其血液動(dòng)力學(xué)改變及體液因素的異常越明顯,血管改變及重塑也越嚴(yán)重[2]。血管鈣化發(fā)生于大動(dòng)脈和中動(dòng)脈管壁的內(nèi)膜和中膜。在CKD 5期患者中已經(jīng)觀察到受累血管的內(nèi)膜鈣化和中膜鈣化混合存在。在維持性血液透析患者中,血管鈣化程度較短期血液透析患者嚴(yán)重。有研究表明超過(guò)80%的年輕血液透析患者存在冠狀動(dòng)脈鈣化,并且隨著透析時(shí)間的延長(zhǎng)而迅速進(jìn)展。冠脈鈣化是危及血液透析患者生命安全的重要原因,成為心血管和腎臟病工作者的臨床難題[3]。本研究發(fā)現(xiàn)在冠脈鈣化的血液透析患者普遍透析時(shí)間要長(zhǎng)于未發(fā)生冠脈鈣化的患者[(3.5±1.2)年 vs(1.6±0.8)年],表明透析時(shí)間越長(zhǎng),可能發(fā)生冠脈鈣化的風(fēng)險(xiǎn)越大。
血液透析患者發(fā)生血管鈣化的機(jī)制目前尚不完全清楚,目前認(rèn)為高血磷、高鈣磷乘積及繼發(fā)性甲狀旁腺功能亢進(jìn)可能是血管鈣化的主要原因。近年來(lái)血管鈣化的研究發(fā)現(xiàn),血管鈣化是一個(gè)基因與蛋白介導(dǎo)的主動(dòng)調(diào)節(jié)過(guò)程,在這一過(guò)程中,血管鈣化是鈣化促進(jìn)因素與抑制因素不平衡的結(jié)果。高磷血癥和攝入過(guò)多鈣劑引起的鈣磷負(fù)荷是導(dǎo)致血管鈣化的最重要因素[4]。
本研究發(fā)現(xiàn),除了LDL和,CHOL增高外,在冠脈鈣化組中存在顯著的繼發(fā)性甲狀旁腺功能亢進(jìn),表現(xiàn)為PTH顯著增高,血磷增高和鈣磷乘積增高等。這表明終末期腎病患者中存在的繼發(fā)性甲狀旁腺功能亢進(jìn)是非常重要的原因。而明確這一點(diǎn),將可能會(huì)對(duì)下一步的干預(yù)提供新的思路。
冠脈鈣化的最終問(wèn)題是要早期識(shí)別這些患者的存在,通過(guò)冠脈CT檢查是一個(gè)有效途徑,與冠脈造影相比,有更好的安全性和定量分析可能。但是從高危因素去早期篩選,早期干預(yù),才是臨床工作者最重要的命題。我們通過(guò)多個(gè)血管鈣化的危險(xiǎn)因素分析和比較,發(fā)現(xiàn)而具有糖尿病史、吸煙史和肥胖方面的比例均高于非冠脈鈣化組,選擇進(jìn)行了低鈣透析的比例卻明顯低于非冠脈鈣化組。
近年高鈣、高磷及鈣磷乘積升高是血透患者發(fā)生心血管鈣化及鈣化防御的主要危險(xiǎn)因素,低鈣透析液是減輕鈣負(fù)荷的一種方式。盡管本研究發(fā)現(xiàn)血鈣離子在兩組并沒(méi)有顯著性的差異,但是有研究顯示,使用1.25%的低鈣透析液有助于血鈣及鈣磷乘積明顯降低,但是在1.5%鈣透析液中,鈣磷指標(biāo)無(wú)變化或升高,推測(cè)低鈣透析液減輕了無(wú)動(dòng)力型骨病患者的高鈣負(fù)荷并降低了鈣磷乘積[5]。本研究也發(fā)現(xiàn)低鈣透析在非冠脈鈣化組更為普遍,提示低鈣透析可能是減少冠脈鈣化的重要措施之一。
綜上所述,冠脈CTA是評(píng)價(jià)維持性血液透析患者冠狀動(dòng)脈鈣化的較好檢測(cè)手段,冠脈鈣化的血液透析患者更多的具有血磷、鈣磷乘積、PTH、CRP、LDL和CHOL升高,以及具有液透析時(shí)間長(zhǎng)、年齡大、糖尿病史、吸煙史和肥胖方面等特征,低鈣透析液可能是降低冠脈鈣化的發(fā)生的一種措施,進(jìn)一步的確定,需要更大樣本量的臨床觀察來(lái)研究。
參考文獻(xiàn)
[1] Nakamura S,Ishibashi Ueda H,Niizuma S,et al.Coronary calcification in patients with chronic kidney disease and coronary artery disease.Clin J Am Soc Nephrol,2009,4(12):1892 900.
[2] 李開(kāi)龍,蘇楠,詹俊,等.維持性血液透析患者血管平滑肌細(xì)胞p53的表達(dá)與血管鈣化的關(guān)系.中國(guó)動(dòng)脈硬化雜志,2009,17(1):31 34.
中圖分類(lèi)號(hào)：R746．4 R255．6
文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B
文章編號(hào)：1672―1349(2007)06―0493―03
肌萎縮側(cè)索硬化(amyotrphic lateral sclerosis，ALS)是一種慢性、進(jìn)行性、多灶性、致殘致死殘率高的中樞神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病。病因未明，臨床上以慢性、進(jìn)行性脊神經(jīng)支配區(qū)的隨意肌麻痹為特征，ALS病人常因呼吸衰竭而死亡，屬于全球性的難題，國(guó)內(nèi)外對(duì)該疾病近年研究較多，由于病因不明，目前尚無(wú)有效治療方法。神經(jīng)干細(xì)胞(neural stem cell，NSC)作為一種新的治療技術(shù)，對(duì)治療各種原因不明的神經(jīng)系統(tǒng)疾病有較大優(yōu)勢(shì)。本研究運(yùn)用臍血間質(zhì)干細(xì)胞(umbilical cord blood mesenchymal stemcell，UCB－MSCs)來(lái)源的NSC治療肌萎縮側(cè)索硬化病人11例，觀察治療前后病人功能獨(dú)立性(FIM)評(píng)分的變化?，F(xiàn)報(bào)道如下。
1資料與方法
1．1臨床資料 共收治11例ALS病人，其中國(guó)外病人9例，國(guó)內(nèi)病人2例；年齡36歲～70歲；男8例，女3例；病程最長(zhǎng)的有13年，最短的僅8個(gè)月，均在國(guó)外或國(guó)內(nèi)通過(guò)臨床評(píng)價(jià)和神經(jīng)肌電圖確診為ALS，并有CF、磁共振成像(MRI)檢查排除其他中樞神經(jīng)和脊神經(jīng)疾病。11例病人均出現(xiàn)不同程度的日常生活能力障礙，但臨床表現(xiàn)不同，其中9例以一側(cè)上肢無(wú)力開(kāi)始為初始癥狀，隨后發(fā)展至另一側(cè)上肢以至雙下肢無(wú)力，病程中伴有不同程度的吞咽及言語(yǔ)障礙，另2例僅出現(xiàn)吞咽及言語(yǔ)障礙而未見(jiàn)上下肢的運(yùn)動(dòng)障礙。全部病人既往曾經(jīng)接受過(guò)力魯唑(riluzole)或中藥、針灸等治療，但療效均不明顯。
1．2治療方法 UCB―MSCs的來(lái)源、采集以及單個(gè)核細(xì)胞的分離、培養(yǎng)以及體外誘導(dǎo)其向NSC分化參考文獻(xiàn)[2]的方法進(jìn)行。
1．2．1 NSC的移植方法 采用腰椎脊髓蛛網(wǎng)膜下腔注射以及靜脈輸注體外誘導(dǎo)分化過(guò)的UCB―MSCs懸液相結(jié)合的方法，懸液的總劑量為(4～6)U，大約1周治療1次，治療前每位病人必須簽訂知情同意書(shū)以及干細(xì)胞移植委托書(shū)，同時(shí)每份UCB―MSCs懸液均確認(rèn)肝炎抗體、梅毒以及其他傳染病相關(guān)的檢驗(yàn)無(wú)異常。其中腰脊髓蛛網(wǎng)膜下腔注射治療，常規(guī)無(wú)菌條件下于腰3與腰4或腰4與腰5間隙穿刺，穿刺成功后測(cè)腦脊液壓力，引出腦脊液2mL，然后緩緩注入靜脈懸液1U，沖管后拔除穿刺針，去枕平躺(4～6)h；靜脈輸注以(6～10)gtt／min速度由外周靜脈緩慢輸注入病人體內(nèi)，每次IU。
1．2．2康復(fù)訓(xùn)練 包括日常生活訓(xùn)練、物理治療(PT)、作業(yè)治療(OT)，每天1次，每次時(shí)間30min；針刺治療選取合谷、足三里、內(nèi)關(guān)、曲池以及肌肉明顯萎縮部位局部穴位，每次留針(10～15)min。
1．3觀察指標(biāo) 觀察治療前后FIM評(píng)分變化，評(píng)價(jià)在獨(dú)立的生活能力訓(xùn)練室由同一治療師進(jìn)行；T淋巴細(xì)胞總數(shù)于治療前以及治療全部完后的次日抽取靜脈血復(fù)查，用美國(guó)產(chǎn)流式細(xì)胞儀檢測(cè)。
1．4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 運(yùn)用SPSS 11．5統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行配對(duì)樣本t檢驗(yàn)，設(shè)定檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0．05。
2結(jié)果
經(jīng)過(guò)干細(xì)胞移植治療后，病人功能獨(dú)立性提高，T淋巴細(xì)胞總數(shù)降低，F(xiàn)IM評(píng)分提高，與治療前比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P
3討論
中圖分類(lèi)號(hào)X592 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A 文章編號(hào) 1674-6708（2011）38-0072-02
Classification and Hazard Analysis of Dioxins-class Chemicals
MA Dejin
Anhui BBCA Chemical Equipment Co.， Ltd.， Bengbu 233010，Anhui Province，China
Abstract The persistence of the toxicity hazard being to human and organism caused by dioxins-class chemicals，has been attaching more and more highly attentions around the world. The related scientific and technical terms had been misused and confused from the large standard literature， this paper recited its normative classification and hazard analysis and some suggestions based on existing key problems in the field of research and practice.
Keywords 1，4-dioxin;dioxins;PCDDs;PCDFs;PCBs
1 二惡英類(lèi)化學(xué)物質(zhì)的分類(lèi)
近半個(gè)世紀(jì)以來(lái)，二惡英類(lèi)化學(xué)物質(zhì)的概念多見(jiàn)于國(guó)內(nèi)外各類(lèi)刊物與文獻(xiàn)上，但在概念的規(guī)范性方面存在頗多異議與混淆，本文基于對(duì)大量科技文獻(xiàn)的研究，對(duì)此進(jìn)行了論述。
1）二f英（1，4-dioxin），僅指1，4-二氧雜環(huán)己二烯，是一個(gè)單環(huán)有機(jī)化合物和工業(yè)上沒(méi)有用處的副產(chǎn)物，二f英也稱(chēng)二氧雜芑，“芑”為有機(jī)化合物環(huán)己間二烯（1，3-cyclohexadiene） 的簡(jiǎn)稱(chēng)，分子式 C6H8，分子量80.13，為無(wú)色液體，具有刺激性和易燃性，結(jié)構(gòu)式為如圖1。二f英分子式C4H4O2，分子量84.07，常溫常壓下是無(wú)色液體狀，有毒并具有易燃性，基本結(jié)構(gòu)見(jiàn)圖2。
2）二f英類(lèi)化學(xué)物質(zhì)（dioxin-type chemicals）是含有二f英結(jié)構(gòu)的衍生化合物，應(yīng)屬于一族多氯代二苯-并-對(duì)-二f英（polychlorinated dibenzo-p-dioxins，簡(jiǎn)稱(chēng)PCDDs）的有機(jī)化合物，基本結(jié)構(gòu)可用下圖3表示，該類(lèi)物質(zhì)按照氯原子的數(shù)目（1-8個(gè)）不同有75種衍生物，它是含有兩個(gè)氧鍵的二f英基本結(jié)構(gòu)連接兩個(gè)苯環(huán)的三環(huán)結(jié)構(gòu)。
研究表明，該類(lèi)物質(zhì)僅有7種結(jié)構(gòu)化合物具有毒性，其中以2，3，7，8-四氯二苯并-對(duì)-二f英（2，3，7，8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin，簡(jiǎn)稱(chēng)TCDDs或T4CDDs）為典型研究對(duì)象，TCDDs或T4CDDs有22個(gè)衍生物異構(gòu)體，分子式C12H4Cl4O2，分子量321.97，結(jié)構(gòu)式見(jiàn)圖4，其毒性相當(dāng)于氰化鉀的1000倍，是人類(lèi)發(fā)現(xiàn)的無(wú)意識(shí)合成副產(chǎn)品中毒性最強(qiáng)的物質(zhì)，有“世紀(jì)之毒”之稱(chēng)，迄今為止該類(lèi)化合物的毒性最大且屬于含有多種毒性的物質(zhì)之一。
3）多氯代二苯并呋喃（polychlorinated dibenzo-p-furans ，簡(jiǎn)稱(chēng)PCDFs），它是在含有一個(gè)氧鍵的呋喃基本結(jié)構(gòu)上連接兩個(gè)苯環(huán)的三環(huán)結(jié)構(gòu)，由于在結(jié)構(gòu)和生物作用上或生態(tài)影響方面與二f英類(lèi)化學(xué)物質(zhì)有相似之處，人們將其歸屬于二f英類(lèi)似化學(xué)物質(zhì)（dioxin-like chemicals）。
眾所周知，呋喃的基本結(jié)構(gòu)如圖5所示，呋喃分子式C4H4O，分子量68.07，是無(wú)色液體，有特殊的氣味，有麻醉和弱刺激作用，極度易燃，吸入后可引起頭痛、頭暈、惡心、呼吸衰竭等病理現(xiàn)象，此物質(zhì)無(wú)論分子結(jié)構(gòu)還是性能方面與二f英有一定的差別。
在呋喃基本結(jié)構(gòu)上連接兩個(gè)苯環(huán)，且苯環(huán)的相應(yīng)位置上與氯結(jié)合后，分別形成135種衍生物，其基本結(jié)構(gòu)式為圖6之右圖，并同圖6之左圖中的PCDDs進(jìn)行對(duì)比，可以明顯看出二者結(jié)構(gòu)上差距[1]。PCDFs 對(duì)生物體的內(nèi)分泌系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)以及生殖系統(tǒng)具有很強(qiáng)的毒性. 目前， 已經(jīng)成為持久性有機(jī)污染物和內(nèi)分泌干擾物方面的研究熱點(diǎn)[2]。
4）多氯聯(lián)苯（polychlorinated biphenyls ， 簡(jiǎn)稱(chēng)PCBs）是與苯環(huán)上碳原子相連接的氫被氯不同程度地取代而形成的一類(lèi)聯(lián)苯化合物，又稱(chēng)共平面多氯聯(lián)苯（co-polychlorinated biphenyls），屬于人工合成的化合物。在過(guò)去的數(shù)十年中廣泛用于作加熱載體、絕緣油和油，同時(shí)由于其良好的工業(yè)用途被作為添加劑而廣泛使用，如添加到各種樹(shù)脂中增加其抗氧化性和耐腐蝕性，添加到橡膠中增強(qiáng)其持久性、滅火性和電絕緣性，添加到各種涂料中作增塑劑等[3]。多氯聯(lián)苯類(lèi)化合物外觀呈流動(dòng)的油狀液體或白色結(jié)晶固體或非結(jié)晶性樹(shù)脂，對(duì)生物體有積聚性和持久毒害作用，一般結(jié)構(gòu)式表達(dá)成C12HnCl（10-n）（0≤n≤9），依照氯原子的個(gè)數(shù)和位置不同，多氯聯(lián)苯有209種異構(gòu)體，其中有13種為有毒化合物，結(jié)構(gòu)圖見(jiàn)圖7。
5）二f英化合物（dioxin-compounds）應(yīng)屬于二f英類(lèi)化學(xué)物質(zhì)和二f英類(lèi)似化學(xué)物質(zhì)的統(tǒng)稱(chēng)，它包含二f英、75種多氯代二苯-并-對(duì)-二f英和135種多氯代二苯并呋喃的所有衍生物或異構(gòu)體。
6）二惡英化合物（dioxins-compounds）或二惡英類(lèi)化學(xué)物質(zhì)（dioxins-class chemicals）屬于二f英化合物與多氯聯(lián)苯系列中那些具有毒性化合物的統(tǒng)稱(chēng)，即僅包含30種有毒化合物，簡(jiǎn)稱(chēng)二惡英（dioxins），顯而易見(jiàn)二惡英中不包含二f英。
2 二惡英類(lèi)化學(xué)物質(zhì)的毒性危害
在二f英化合物中，對(duì)于PCDDs和PCDFs兩類(lèi)化合物中的氯原子數(shù)在1個(gè)~3個(gè)氯者不具備毒性，氯原子數(shù)在在4-8個(gè)的該類(lèi)衍生物或異構(gòu)體具有毒性，分別有7種和10種有毒化合物，該類(lèi)物質(zhì)的名稱(chēng)及簡(jiǎn)稱(chēng)見(jiàn)國(guó)家環(huán)保部的四個(gè)配套系列標(biāo)準(zhǔn)之一[4]；多氯聯(lián)苯的毒性相對(duì)PCDDs和PCDFs兩類(lèi)化合物要低，在209種異構(gòu)體中有13種屬于毒性物質(zhì)。
二惡英類(lèi)化學(xué)物質(zhì)的毒性危害已經(jīng)引起世界各國(guó)的高度重視，中國(guó)國(guó)家環(huán)境保護(hù)部等九部委于2010年10月19日聯(lián)合發(fā)文《關(guān)于加強(qiáng)二惡英污染防治的指導(dǎo)意見(jiàn)》（環(huán)發(fā)〔2010〕123號(hào)）指出：二惡英具有很強(qiáng)生物毒性，同時(shí)具有難以降解、可在生物體內(nèi)蓄積的特點(diǎn)，進(jìn)入環(huán)境將長(zhǎng)期殘留，對(duì)人類(lèi)健康和可持續(xù)發(fā)展構(gòu)成威脅；同時(shí)強(qiáng)調(diào)到2015年，建立比較完善的二惡英污染防治體系和長(zhǎng)效監(jiān)管機(jī)制，重點(diǎn)行業(yè)二惡英排放強(qiáng)度降低10%，基本控制二惡英排放增長(zhǎng)趨勢(shì)。同時(shí)本權(quán)威性文件所使用的“二惡英”而非“二f英”，筆者認(rèn)為更趨于規(guī)范性用法。
目前研究發(fā)現(xiàn)，二惡英包括30種化合物，這類(lèi)有機(jī)物質(zhì)性質(zhì)非常穩(wěn)定，熔點(diǎn)較高，極難溶于水，可以溶于大部分有機(jī)溶劑，大多屬于無(wú)色無(wú)味的脂溶性物質(zhì)，所以非常容易在生物體內(nèi)積累，自然界的微生物和水解作用對(duì)二惡英的分子結(jié)構(gòu)影響較小，因此，環(huán)境中的二惡英很難自然降解消除，對(duì)人類(lèi)健康影響的科研成果已經(jīng)越來(lái)越多地展現(xiàn)出來(lái)。普遍被認(rèn)同的觀點(diǎn)主要有：二惡英類(lèi)化學(xué)物質(zhì)是一類(lèi)由碳、氫、氧及鹵族元素組成的環(huán)狀分子，它們不易揮發(fā)、不易溶于水，但卻溶于油脂，進(jìn)入人體后極易留存；二惡英對(duì)人類(lèi)的危害主要表現(xiàn)在：引起皮膚損傷性疾病，具有強(qiáng)烈的致癌性、致畸性及致突變性，同時(shí)還造成生殖毒性、免疫毒性和內(nèi)分泌毒性。
3 結(jié)論
對(duì)二惡英類(lèi)化學(xué)物質(zhì)的研究，首先應(yīng)對(duì)術(shù)語(yǔ)予以科學(xué)分類(lèi)和界定，以便進(jìn)一步研究系統(tǒng)中產(chǎn)物的來(lái)源及其衍生后果，有益于理清研究思路和突出科研重點(diǎn)，本文中術(shù)語(yǔ)及有關(guān)提法與現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)及有關(guān)權(quán)威文獻(xiàn)有很多不一致之處，僅屬于作者個(gè)人觀點(diǎn)，不足之處敬請(qǐng)專(zhuān)業(yè)人士不吝賜教和指正，期望從追根朔源角度探究科學(xué)問(wèn)題；二惡英給環(huán)境污染帶來(lái)的危害將直接影響人類(lèi)的健康，其單一或混合異構(gòu)體的形成機(jī)理、對(duì)環(huán)境及人類(lèi)的危害特性、毒性特征、毒性當(dāng)量及限量、消除危害措施等無(wú)疑牽涉多學(xué)科專(zhuān)業(yè)知識(shí)，盡管目前已經(jīng)擁有初步的防控體系和措施，仍有諸多難題等待更多人士探討和研究。
參考文獻(xiàn)
[1]黃汝廣，等.二f英污染及其防控措施的研究進(jìn)展[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2007(30)：9670-9671.
實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革是以培養(yǎng)學(xué)生的實(shí)踐能力、創(chuàng)新能力為宗旨,以實(shí)驗(yàn)資源開(kāi)放共享為基礎(chǔ),全面提高實(shí)驗(yàn)教學(xué)水平和實(shí)驗(yàn)室使用效益為目的的創(chuàng)新型實(shí)驗(yàn)室管理機(jī)制[1]-[3]。目前,普通高校的實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革都不同程度地實(shí)踐著實(shí)驗(yàn)室信息化教學(xué)管理。這種教學(xué)管理方式一方面有利于整合現(xiàn)有的實(shí)驗(yàn)資源,提高實(shí)驗(yàn)室的管理水平,另一方面有利于激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)熱情,調(diào)動(dòng)學(xué)生的積極性、主動(dòng)性,培養(yǎng)學(xué)生的創(chuàng)新能力和實(shí)踐能力,使學(xué)生具有獨(dú)立思維,是一種體現(xiàn)能力培養(yǎng)、提高素質(zhì)教育的有效方式[4]-[6]。應(yīng)用信息化實(shí)驗(yàn)教學(xué)管理打破了院、系、班級(jí)的局限,由學(xué)生提前預(yù)約實(shí)驗(yàn)內(nèi)容、時(shí)間,根據(jù)預(yù)約登記情況,實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)老師做好充分準(zhǔn)備,保證實(shí)驗(yàn)課有序地進(jìn)行。
1.實(shí)驗(yàn)教學(xué)信息化管理的優(yōu)點(diǎn)與一般流程
實(shí)驗(yàn)教學(xué)信息化管理旨在搞活實(shí)驗(yàn)課堂,通過(guò)實(shí)驗(yàn)樹(shù)立學(xué)生創(chuàng)新意識(shí),提高學(xué)生的實(shí)際動(dòng)手能力,獨(dú)立分析問(wèn)題的,以能力及合理安排時(shí)間的能力[7]。
傳統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)課程都是教務(wù)處以院、系、班為單位統(tǒng)一安排實(shí)驗(yàn)課表,實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)老師選定實(shí)驗(yàn)內(nèi)容,學(xué)生只能在規(guī)定的實(shí)驗(yàn)室、規(guī)定的時(shí)間內(nèi)做規(guī)定的實(shí)驗(yàn)[8]。隨著教學(xué)內(nèi)容和方式的改變,學(xué)校實(shí)行學(xué)分制,每個(gè)學(xué)生所選修的課程都不盡相同,上課時(shí)間不統(tǒng)一。實(shí)行信息化實(shí)驗(yàn)教學(xué)管理后,學(xué)生可以在實(shí)驗(yàn)室開(kāi)放的時(shí)間內(nèi)隨機(jī)預(yù)約做實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)老師可以根據(jù)管理系統(tǒng)提供的信息確定每天的實(shí)驗(yàn)人數(shù),合理有效地準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)儀器的臺(tái)套數(shù)。實(shí)驗(yàn)選課操作時(shí),實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)老師應(yīng)要求學(xué)生提交預(yù)習(xí)報(bào)告,做到基本掌握實(shí)驗(yàn)內(nèi)容。對(duì)預(yù)習(xí)較差、準(zhǔn)備不夠充分的學(xué)生暫緩其實(shí)驗(yàn)資格[9]。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,指導(dǎo)老師對(duì)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作的學(xué)生從旁觀察,基本上由學(xué)生自行處理實(shí)驗(yàn)過(guò)程中遇到的問(wèn)題,解決不了時(shí),再給予指導(dǎo)解決。實(shí)驗(yàn)操作完成后,保存原始記錄數(shù)據(jù),經(jīng)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)老師簽字后,實(shí)驗(yàn)成績(jī)生效。
實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)老師在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中進(jìn)行巡回指導(dǎo)、答疑,并及時(shí)監(jiān)督實(shí)驗(yàn)者能否獨(dú)立完成實(shí)驗(yàn),嚴(yán)把學(xué)生實(shí)驗(yàn)質(zhì)量關(guān)。基礎(chǔ)必做實(shí)驗(yàn)要求必須單人操作,選作實(shí)驗(yàn)和綜合創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)可由2―3人合作完成。
2.實(shí)驗(yàn)教學(xué)信息化管理系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)與功能
實(shí)行信息化教學(xué)管理的實(shí)驗(yàn)課程,可將實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目劃分為基礎(chǔ)必做實(shí)驗(yàn)、選做實(shí)驗(yàn)及綜合創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)等三個(gè)模塊,在模塊下建立各個(gè)實(shí)驗(yàn)的名稱(chēng)、實(shí)驗(yàn)時(shí)數(shù)。其中基礎(chǔ)必做實(shí)驗(yàn)下設(shè)2-3個(gè)項(xiàng)目(每個(gè)實(shí)驗(yàn)2-3學(xué)時(shí)),為每個(gè)學(xué)生都必須獨(dú)立完成的實(shí)驗(yàn)。選做實(shí)驗(yàn)和綜合創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)下各設(shè)5-10個(gè)實(shí)驗(yàn)(每個(gè)實(shí)驗(yàn)3-6學(xué)時(shí)),由學(xué)生自行選擇感興趣的實(shí)驗(yàn),選滿30學(xué)時(shí)為止。系統(tǒng)可記錄每個(gè)學(xué)生的學(xué)號(hào)、密碼、姓名、班級(jí)、院系、聯(lián)系方式等信息,并對(duì)每次實(shí)驗(yàn)人數(shù)作出上限定額(20人)。當(dāng)實(shí)驗(yàn)室滿員時(shí),可提示學(xué)生另選實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目及時(shí)間,以預(yù)防同時(shí)登錄的學(xué)生超過(guò)實(shí)驗(yàn)室最大容納量。
為了確保信息化管理的時(shí)效性和有效性,學(xué)校需要借助實(shí)驗(yàn)教學(xué)信息化管理系統(tǒng),其結(jié)構(gòu)組成如圖1所示。
(1)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目查詢(xún)
該模塊的工作過(guò)程如下:當(dāng)學(xué)生輸入學(xué)號(hào)、密碼后,系統(tǒng)在數(shù)據(jù)庫(kù)中調(diào)出學(xué)生姓名、所在班級(jí)、院系和聯(lián)系方式等。激活“查詢(xún)”按鈕后顯示“實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目庫(kù)”欄,下設(shè)“基礎(chǔ)必做實(shí)驗(yàn)”、“選做實(shí)驗(yàn)”、“綜合創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)”。其中“基礎(chǔ)必做實(shí)驗(yàn)”為每個(gè)學(xué)生必須首先完成的實(shí)驗(yàn),只有完成該欄目下設(shè)的實(shí)驗(yàn)后,學(xué)生才能自由選擇后兩欄下設(shè)的實(shí)驗(yàn)。選定實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目后,系統(tǒng)提供預(yù)約“實(shí)驗(yàn)時(shí)間”,包括實(shí)驗(yàn)周數(shù)、日期、節(jié)次,通?；A(chǔ)必做實(shí)驗(yàn)在1-2周內(nèi)結(jié)束?？紤]到學(xué)生可能由于突發(fā)事件需要調(diào)整已預(yù)選的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目,系統(tǒng)提供退選功能。整個(gè)預(yù)約過(guò)程中信息的輸入需確保其準(zhǔn)確性,對(duì)于登錄中出現(xiàn)的錯(cuò)誤進(jìn)行提示并及時(shí)修改。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容制作成課件掛于網(wǎng)上,便于學(xué)生預(yù)習(xí)并熟記操作過(guò)程。根據(jù)漸進(jìn)式的教學(xué)模式,限定學(xué)生一周內(nèi)不能預(yù)約超過(guò)兩個(gè)實(shí)驗(yàn)。
(2)查詢(xún)?yōu)g覽
該模塊下設(shè)教師端及學(xué)生端,教師端包括成績(jī)錄入及查詢(xún)?yōu)g覽兩項(xiàng),允許教師錄入學(xué)生單項(xiàng)實(shí)驗(yàn)成績(jī)及查詢(xún)?nèi)肯嚓P(guān)信息,包括實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目、各實(shí)驗(yàn)室學(xué)生數(shù)、學(xué)生成績(jī)等;學(xué)生端允許學(xué)生查詢(xún)預(yù)約實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目時(shí)間、所在實(shí)驗(yàn)室和本人實(shí)驗(yàn)成績(jī)。
(3)統(tǒng)計(jì)報(bào)表打印
該模塊可對(duì)每日預(yù)約的實(shí)驗(yàn)學(xué)生人數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì),實(shí)驗(yàn)學(xué)時(shí)全部完成后,統(tǒng)計(jì)實(shí)驗(yàn)成績(jī);該模塊下設(shè)儀器設(shè)備庫(kù),可根據(jù)需要匯總相關(guān)儀器使用情況和儀器設(shè)備維修情況。
(4)考核系統(tǒng)
該模塊下設(shè)理論考試及交流區(qū)。理論考核主要是考核學(xué)生掌握實(shí)驗(yàn)的情況。學(xué)生完成所有實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目后,需登陸該模塊,系統(tǒng)隨機(jī)給定20道題目,多為單選或多選題,學(xué)生需在10分鐘內(nèi)答完,完成后系統(tǒng)打分。這一部分的成績(jī)將記入學(xué)生的總成績(jī)。交流區(qū)可實(shí)現(xiàn)教師與學(xué)生的互動(dòng)交流,學(xué)生在預(yù)習(xí)過(guò)程中或?qū)嶒?yàn)過(guò)程中遇到的問(wèn)題可在線上與教師進(jìn)行探討,以達(dá)到更好地掌握實(shí)驗(yàn)的目的。
3.信息化教學(xué)管理在微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中的應(yīng)用
(1)傳統(tǒng)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中存在的問(wèn)題
微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)是生物、食品專(zhuān)業(yè)學(xué)生必修的一門(mén)重要基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)課程[6]。我校微生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)室有兩間,微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課最多一學(xué)期平行有5個(gè)班,每個(gè)班分兩批進(jìn)行,傳統(tǒng)的教務(wù)處統(tǒng)一排課通常只能排出一個(gè)班一批學(xué)生的時(shí)間,另一批學(xué)生只能由教師與學(xué)生商定后另選時(shí)間,而微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)通常開(kāi)在第五學(xué)期,這一學(xué)期學(xué)生的課程較多,因此,多數(shù)時(shí)候第二批只能選在晚上或是周末上課,這在無(wú)形中就加重了教師和學(xué)生的負(fù)擔(dān);同時(shí),這種排課方式往往導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)課程集中在一定時(shí)間內(nèi),造成短時(shí)期內(nèi)實(shí)驗(yàn)室超負(fù)荷運(yùn)作,從而影響實(shí)驗(yàn)設(shè)備的正常維護(hù)管理。傳統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)教學(xué)準(zhǔn)備過(guò)程均由教師完成,或是由教師帶領(lǐng)個(gè)別學(xué)生完成,這就使得絕大部分的學(xué)生不能參與實(shí)驗(yàn)的整個(gè)過(guò)程,違背培養(yǎng)學(xué)生獨(dú)立完成實(shí)驗(yàn)的初衷。運(yùn)用信息化教學(xué)管理系統(tǒng)可以有效地解決這些問(wèn)題,并大大提高實(shí)驗(yàn)室的使用率。
(2)信息化教學(xué)管理在微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用
微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)總學(xué)時(shí)30學(xué)時(shí),通常安排8-10個(gè)實(shí)驗(yàn)。在信息化教學(xué)管理系統(tǒng)中,學(xué)生在開(kāi)學(xué)一周內(nèi),首先需登陸實(shí)驗(yàn)室信息化教學(xué)管理系統(tǒng),進(jìn)入實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目查詢(xún)模塊,該模塊中將實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目分為三個(gè)階段,即基礎(chǔ)必做實(shí)驗(yàn)、選做實(shí)驗(yàn)和綜合創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)。學(xué)生首先進(jìn)入基礎(chǔ)必做實(shí)驗(yàn)階段,該階段通常安排2-3個(gè)實(shí)驗(yàn),如培養(yǎng)基的配制、分裝及滅菌、微生物純種分離法、光學(xué)顯微鏡的使用等。學(xué)生必須在2周內(nèi)完成這一階段的實(shí)驗(yàn)。在兩周內(nèi)第一階段的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目將滾動(dòng)開(kāi)設(shè)。學(xué)生在選擇了實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目后,可查詢(xún)實(shí)驗(yàn)時(shí)間,同時(shí)根據(jù)自己的需要,預(yù)約合適的時(shí)間,如預(yù)約的時(shí)間段內(nèi)人數(shù)已滿,系統(tǒng)提示另選時(shí)段。預(yù)約好時(shí)間后,如學(xué)生臨時(shí)有事,可登陸系統(tǒng)進(jìn)行退選,另選時(shí)間。學(xué)生每完成一個(gè)實(shí)驗(yàn),教師需登陸該系統(tǒng),給出實(shí)驗(yàn)成績(jī)系統(tǒng)將根據(jù)教師所給的成績(jī),判斷學(xué)生是否完成該階段的學(xué)習(xí),以防止學(xué)生在選課后不去上課的情況發(fā)生。
在完成第一階段的學(xué)習(xí)后,學(xué)生對(duì)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)有了初步的認(rèn)識(shí),可以進(jìn)入選做實(shí)驗(yàn)階段。這一階段安排10個(gè)實(shí)驗(yàn)供選擇,如微生物直接計(jì)數(shù)法、微生物間接計(jì)數(shù)法、細(xì)菌簡(jiǎn)單染色法、革蘭氏染色法、莢膜染色法、芽孢染色法、環(huán)境微生物的檢測(cè)和菌落識(shí)別、放線菌的培養(yǎng)及形態(tài)觀察、霉菌的培養(yǎng)及形態(tài)觀察、細(xì)菌的生理生化實(shí)驗(yàn)等。這10個(gè)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目將在8-10周以?xún)?nèi)滾動(dòng)開(kāi)設(shè),學(xué)生可根據(jù)自己的實(shí)際情況,選擇5-6個(gè)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目,選擇方法同上。為了避免學(xué)生在幾周內(nèi)集中選課,每人每周都只能預(yù)約一個(gè)時(shí)段,這種方式可有效地減輕因?qū)W生集中選課而產(chǎn)生的實(shí)驗(yàn)室的日常管理壓力。這一階段的實(shí)驗(yàn)相比第一階段難度要大,實(shí)驗(yàn)時(shí)間長(zhǎng),能夠培養(yǎng)學(xué)生主動(dòng)學(xué)習(xí)能力、獨(dú)立思考能力,以及分析問(wèn)題、解決問(wèn)題的能力,激發(fā)學(xué)生潛在的創(chuàng)新意識(shí)。
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在完成第二階段的學(xué)習(xí)以后,進(jìn)入第三階段綜合創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)階段,該階段設(shè)有2-3個(gè)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目,如微生物量的測(cè)定和生長(zhǎng)曲線的繪制、物理、化學(xué)因素對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響、環(huán)境中細(xì)菌的分離鑒定等,選課方法同上。由于該階段的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目為綜合性實(shí)驗(yàn),需要2-4人協(xié)助完成,因此,在選課時(shí),需把小組其他成員名字在備注中說(shuō)明,方便教師查詢(xún)。學(xué)生根據(jù)前兩階段選課的實(shí)際情況,選擇1-2個(gè)實(shí)驗(yàn),以保證實(shí)驗(yàn)總學(xué)時(shí)不少于30學(xué)時(shí)。這一階段的實(shí)驗(yàn)是對(duì)學(xué)生實(shí)驗(yàn)技能和實(shí)驗(yàn)方法的綜合訓(xùn)練,能夠進(jìn)一步激發(fā)學(xué)生的創(chuàng)新能力。同時(shí),由于這一階段實(shí)驗(yàn)的特殊性,在選課后,學(xué)生不能直接預(yù)約實(shí)驗(yàn)時(shí)間,而需以小組(2-4人)為單位,在給定的范圍內(nèi),先自行查閱資料,設(shè)計(jì)出具有創(chuàng)新性的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和方案,再在線上與教師交流探討實(shí)驗(yàn)可行性,只有在確定后才能預(yù)約實(shí)驗(yàn)藥品、設(shè)備及實(shí)驗(yàn)時(shí)間等,最后完整記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果、總結(jié)分析并撰寫(xiě)報(bào)告上交。通過(guò)這個(gè)階段的訓(xùn)練,學(xué)生的實(shí)踐能力得到全面提高,創(chuàng)新能力和綜合素質(zhì)也得到長(zhǎng)足的發(fā)展。
在學(xué)生完成所有階段的學(xué)習(xí)后,教師可統(tǒng)一安排考試時(shí)間,讓學(xué)生登陸考試模塊進(jìn)行實(shí)驗(yàn)理論考試。在該模塊中系統(tǒng)將從試題庫(kù)中隨機(jī)給定20道題目,多為單選或多選題,學(xué)生需在10分鐘內(nèi)答完,完成后系統(tǒng)打分?？荚嚱Y(jié)束后,教師可登陸系統(tǒng)查詢(xún)結(jié)果,同時(shí)可查詢(xún)實(shí)際選課情況及實(shí)驗(yàn)設(shè)備使用情況,根據(jù)學(xué)生對(duì)課程的學(xué)習(xí)情況及實(shí)驗(yàn)設(shè)備使用率,適當(dāng)調(diào)整下次開(kāi)設(shè)的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容。
實(shí)驗(yàn)教學(xué)信息化管理系統(tǒng)改變了傳統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)教學(xué)過(guò)程,在這種教學(xué)模式下,教師不再充當(dāng)“保姆”的角色,學(xué)生也不再是等待喂食的“填鴨”。通過(guò)實(shí)驗(yàn)預(yù)約選時(shí)操作,教師可以宏觀地調(diào)控實(shí)驗(yàn)室、實(shí)驗(yàn)設(shè)備及實(shí)驗(yàn)學(xué)生;學(xué)生改變了被動(dòng)接受式的學(xué)習(xí)方式,主動(dòng)地選擇感興趣的學(xué)習(xí)內(nèi)容,從而充分調(diào)動(dòng)學(xué)習(xí)積極性、主動(dòng)性和創(chuàng)造性。在實(shí)際運(yùn)行過(guò)程中,這一系統(tǒng)將不斷地得到完善,使得實(shí)驗(yàn)教學(xué)達(dá)到現(xiàn)代化、科學(xué)化管理水平。
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子癇前期是指孕婦在懷孕20周以后出現(xiàn)高血壓、蛋白尿等癥狀，稱(chēng)之為子癇前期[1]。由于子癇前期孕婦的胎盤(pán)組織結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，會(huì)嚴(yán)重影響胎兒的健康，是導(dǎo)致圍生兒死亡的主要原因[2]。本次研究通過(guò)對(duì)邢臺(tái)市第三醫(yī)院60例剖宮分娩產(chǎn)婦進(jìn)行對(duì)比分析，從而研究子癇前期胎盤(pán)床滋養(yǎng)細(xì)胞浸潤(rùn)程度及其螺旋動(dòng)脈和微血管的變化，現(xiàn)報(bào)道結(jié)果如下。
1 資料與方法
1.1一般資料 選取邢臺(tái)市第三醫(yī)院婦產(chǎn)科2013年1月～2014年1月收治的60例剖宮產(chǎn)分娩產(chǎn)婦產(chǎn)婦作為研究對(duì)象，經(jīng)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)及產(chǎn)婦知情同意下由臨床醫(yī)師根據(jù)妊娠情況分為觀察組和對(duì)照組，其中觀察組30例，為正常妊娠組，平均年齡（27.12±3.01）歲，平均孕周為（37.98±1.26）w；對(duì)照30例，為子癇前期，平均年齡（28.98±1.06）歲，平均孕周為（38.02±0.98）w。所有入選的產(chǎn)婦排除內(nèi)科合并癥及產(chǎn)科并發(fā)癥產(chǎn)婦。兩組產(chǎn)婦性別、年齡、孕周期，一般基線資料差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。
1.2方法 對(duì)兩組患者進(jìn)行樣本采集和處理，取剖宮產(chǎn)手術(shù)患者的胎盤(pán)床活檢標(biāo)本進(jìn)行臨床檢測(cè)和分析。注意應(yīng)取胎盤(pán)附著的中央位置進(jìn)行樣本采集，要對(duì)組織塊進(jìn)行10%中性甲醛固定，室溫梯度酒精脫水，石蠟包埋處理，以保證樣本的使用。
1.3觀察指標(biāo) 在顯微鏡下進(jìn)行觀察兩組化產(chǎn)婦胎盤(pán)著床的深度、胎盤(pán)床滋養(yǎng)細(xì)胞浸潤(rùn)程度及其螺旋動(dòng)脈和微血管的變化。其中螺旋動(dòng)脈的生理變化參照《婦產(chǎn)科病理》進(jìn)行判斷及觀察。
1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 本次研究當(dāng)中的所有數(shù)據(jù)均采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理，計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，計(jì)數(shù)資料采用率（%）表示，P
2 結(jié)果
2.1滋養(yǎng)細(xì)胞浸潤(rùn)與子宮淺肌層深度比較 滋養(yǎng)細(xì)胞浸潤(rùn)密度在≤1/2底蛻膜中對(duì)照組與觀察組均為30例，比例100.00%，兩組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；滋養(yǎng)細(xì)胞浸潤(rùn)密度在≥1/2底蛻膜中對(duì)照組30例，比例100.00%，觀察組為15例，比例50.00%，兩組比較P為0.0015，比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P
2.2滋養(yǎng)細(xì)胞浸潤(rùn)與子宮淺肌層密度比較 滋養(yǎng)細(xì)胞浸潤(rùn)密度在≤1/2底蛻膜中對(duì)照組為（21.5±5.6）個(gè)/Hp，觀察組為（20.9±6.1）個(gè)/Hp，兩組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；自滋養(yǎng)細(xì)胞浸潤(rùn)密度≥1/2處開(kāi)始到3LPF處對(duì)照組的密度分別為（20.5±5.8）、（19.6±4.2）個(gè)/Hp、（16.5±3.2）個(gè)/Hp、（10.4±2.8）個(gè)/Hp、（6.5±1.2）個(gè)/Hp，觀察組分別為（12.6±3.1）、（8.8±3.2）個(gè)/Hp、（2.1±0.9）個(gè)/Hp、（0.8±0.2）個(gè)/Hp、（0.2±0.1）個(gè)/Hp，兩組產(chǎn)婦比較P值分別為0.0098、0.004561、0.0011、0.0009、0.0001，兩組產(chǎn)婦自滋養(yǎng)細(xì)胞浸潤(rùn)密度≥1/2處開(kāi)始到3LPF處子宮淺肌層密度比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P
2.3兩組產(chǎn)婦膜螺旋動(dòng)脈變化比較 兩組患者螺旋動(dòng)脈條數(shù)均為180條，其中對(duì)照組患者胎盤(pán)床底蛻螺旋動(dòng)脈無(wú)生理變化48條，有生理變化110條，有病理變化22條，觀察組無(wú)生理變化56條，有生理變化104條，有病理變化20條，兩組患者胎盤(pán)床底蛻螺旋動(dòng)脈無(wú)生理變化和有生理變化者比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）；其中對(duì)照組患者胎盤(pán)子宮淺肌層無(wú)生理變化30條，有生理變130條，有病理變化20條，觀察組無(wú)生理變化60條，有生理變化70條，有病理變化50條，兩組患者胎盤(pán)床子宮淺肌層螺旋動(dòng)脈比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P
2.4兩組產(chǎn)婦胎盤(pán)床微血管比較 對(duì)照組產(chǎn)婦底蛻膜微血管為（62.7±12.9）個(gè)/×200，子宮淺肌層微血管為（55.4±10.6）個(gè)/×200；觀察組產(chǎn)婦底蛻膜微血管為（23.1±6.6）個(gè)/×200，子宮淺肌層微血管為（18.2±4.1）個(gè)/×200；兩組患者底蛻膜微血管比較t值為13.9587，P值為0.0001，子宮淺肌層微血管比較t值為12.0214，P值為0.0001。兩組患者胎盤(pán)床微血管比較異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P
3 討論
產(chǎn)婦正常妊娠過(guò)程中滋養(yǎng)層細(xì)胞自蛻膜不斷向胎盤(pán)組織進(jìn)行浸潤(rùn)，最終達(dá)到子宮淺肌層5.5mm內(nèi)，且在胎盤(pán)的形成過(guò)程中滋養(yǎng)層細(xì)胞浸潤(rùn)螺旋動(dòng)脈會(huì)導(dǎo)致孕婦產(chǎn)生妊娠反應(yīng)[3]。本次研究中對(duì)正常妊娠及子癇前期妊娠進(jìn)行滋養(yǎng)細(xì)胞浸潤(rùn)分析，發(fā)現(xiàn)滋養(yǎng)細(xì)胞浸潤(rùn)密度在≤1/2底蛻膜中兩組產(chǎn)婦的細(xì)胞浸潤(rùn)程度無(wú)差別，在≥1/2底蛻膜中對(duì)照組浸潤(rùn)程度明顯高于觀察組，結(jié)果顯示子癇前期胎盤(pán)床滋養(yǎng)細(xì)胞浸潤(rùn)程度較弱若。由于滋養(yǎng)細(xì)胞浸潤(rùn)程度的改變導(dǎo)致產(chǎn)婦的螺旋動(dòng)脈及微血管發(fā)生變化，研究結(jié)果顯示：對(duì)照組產(chǎn)婦底蛻膜和子宮淺肌層的微血管的個(gè)數(shù)明顯高于觀察組；對(duì)照組患者胎盤(pán)床底蛻螺旋動(dòng)脈無(wú)生理變化48條，有生理變化110條，有病理變化22條，觀察組無(wú)生理變化56條，有生理變化104條，有病理變化20條；對(duì)照組患者胎盤(pán)子宮淺肌層無(wú)生理變化30條，有生理變130條，有病理變化20條，觀察組無(wú)生理變化60條，有生理變化70條，有病理變化50條。子癇前期產(chǎn)婦螺旋動(dòng)脈有生理變化的數(shù)量增多，且在子宮淺肌層表現(xiàn)較為明顯。由于滋養(yǎng)細(xì)胞浸潤(rùn)程度減弱觀察組患者的微血管變化數(shù)量明顯降低。
綜上所述，子癇前期胎盤(pán)床滋養(yǎng)細(xì)胞浸潤(rùn)程度弱，胎盤(pán)床螺旋動(dòng)脈變化主要發(fā)生在子宮淺肌層中，其中胎盤(pán)床微血管會(huì)產(chǎn)生受阻現(xiàn)象，應(yīng)加強(qiáng)注意。
參考文獻(xiàn)：