序論：好文章的創(chuàng)作是一個(gè)不斷探索和完善的過程，我們?yōu)槟扑]一篇牛支原體病流行病學(xué)調(diào)查分析范例，希望它們能助您一臂之力，提升您的閱讀品質(zhì)，帶來更深刻的閱讀感受。

牛型支原體于上世紀(jì)六十年代初期首次在美國(guó)患有乳腺炎的患病牛牛乳當(dāng)中分離得到，到上世紀(jì)70年代中期，首次報(bào)告該種支原體與牛呼吸系統(tǒng)疾病密切相關(guān)。目前已知的牛型支原體能夠?qū)е屡Ｈ撼霈F(xiàn)肺炎、關(guān)節(jié)炎、乳房炎，同時(shí)還會(huì)導(dǎo)致牛群出現(xiàn)結(jié)膜炎、生殖道炎癥、妊娠母牛出現(xiàn)流產(chǎn)，導(dǎo)致不孕不育，是牛呼吸道疾病綜合征的主要發(fā)病原因[1]。近些年，通過流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)牛支原體病在我國(guó)的西藏、青海、海南等牛養(yǎng)殖主產(chǎn)區(qū)廣泛發(fā)生流行，該種疾病的傳播流行與牛群的交易運(yùn)輸密切相關(guān)，大多在引種牛群兩周左右突然出現(xiàn)臨床癥狀。

1試驗(yàn)材料與方法

1.1試驗(yàn)材料獲取

2020年到2021年青海省門源縣的5個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)當(dāng)中按照隨機(jī)原則，對(duì)當(dāng)?shù)仞B(yǎng)殖的牦牛進(jìn)行血液采集，將采集到的血液放置在采樣袋當(dāng)中，低溫保存送到試驗(yàn)室進(jìn)行血清分離，兩年間共采集血清樣本1363份（青石咀鎮(zhèn)、皇城蒙古族鄉(xiāng)、蘇吉灘鄉(xiāng)、大灘鄉(xiāng)、北山鄉(xiāng)分別采集236份、291份、303份、223份、310份）和1923份（青石咀鎮(zhèn)、皇城蒙古族鄉(xiāng)、蘇吉灘鄉(xiāng)、大灘鄉(xiāng)、北山鄉(xiāng)分別采集436份、333份、421份、420份和313份），血清處理完畢之后在-20℃環(huán)境下進(jìn)行低溫保存。檢測(cè)試劑盒是由上海玉屏生物科技有限公司生產(chǎn)。

1.2檢測(cè)方法

將采集到的血清恢復(fù)到室溫狀態(tài)之下，按照使用說明書的要求添加試劑與血清進(jìn)行進(jìn)一步的反應(yīng)，然后使用分光度計(jì)進(jìn)一步測(cè)定分光度值，根據(jù)分光度值來判定血清樣本的陰性和陽性[2]。陽性對(duì)照孔平均值要不小于1.00，陰性對(duì)照值平均孔要不大于0.10。臨界值=陰性對(duì)照孔的平均值+0.15。如果樣品的OD值小于臨界值則可以判定為牛支原體陰性，如果樣品的OD值不小于臨界值，則可以判定支原體陽性。

2結(jié)果

2.12020年青海省門源縣牦牛支原體病的感染情況調(diào)查

2020年從青海省門源縣的5個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)當(dāng)中，共采集到牦牛的血清樣本1363份按照抗體檢測(cè)試劑盒的要求進(jìn)行抗體水平監(jiān)測(cè)，能夠發(fā)現(xiàn)不同鄉(xiāng)鎮(zhèn)的抗品陽性率存在一定差異性，其中以牦牛養(yǎng)殖數(shù)量相對(duì)較多鄉(xiāng)鎮(zhèn)和民族地區(qū)的陽性率相對(duì)較高，2021年青海省門源縣5個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)牦牛血清樣本中，支原體感染的總陽性率在7.92%。從感染情況來看，不同鄉(xiāng)鎮(zhèn)的支原體感染存在很大差異性，有些鄉(xiāng)鎮(zhèn)尤其是牦牛養(yǎng)殖數(shù)量相對(duì)較多的鄉(xiāng)鎮(zhèn)和民族地區(qū)，牦牛專用軟體的感染率相對(duì)較高，總體的陽性感染率相對(duì)較高。出現(xiàn)這種情況，主要是因?yàn)楫?dāng)?shù)剞r(nóng)牧民群眾對(duì)支原體病的危害認(rèn)知不足，沒有做出有效的流行病學(xué)調(diào)查，對(duì)該種疾病的發(fā)生流行動(dòng)態(tài)掌握不足，發(fā)生疾病之后，經(jīng)常會(huì)將其作為牛出血性敗血癥去治療，導(dǎo)致防治效果變差，不能夠在短時(shí)間內(nèi)清除病情，再加上養(yǎng)殖場(chǎng)會(huì)存在隱性感染病例，周期性的侵染牦牛群，導(dǎo)致該種疾病在養(yǎng)殖場(chǎng)中的周期傳播流行。詳細(xì)情況如表1所示。

2.22021年青海省門源縣牦牛支原體病的感染情況調(diào)查

2021年從青海省門源縣5個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)當(dāng)中共采集牦牛血清樣本1923份，按照支原體抗體檢測(cè)試劑盒的使用說明進(jìn)行抗體水平監(jiān)測(cè)，能夠發(fā)現(xiàn)5個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)牦牛血清的陽性抗體率比2020年呈現(xiàn)升高的趨勢(shì)，并且不同鄉(xiāng)鎮(zhèn)地區(qū)的牦牛陽性率呈現(xiàn)出差異性的變化，有些地區(qū)的陽性率呈現(xiàn)升高有的些地區(qū)的陽性率逐漸下降，但5個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)牦牛支原體病的總體陽性率在12.38%，陽性感染率逐漸升高。出現(xiàn)這種情況一方面是因?yàn)轲B(yǎng)殖規(guī)模逐漸擴(kuò)大背景下很多養(yǎng)殖戶需要從外地引種，在引種過程中沒有進(jìn)行有效的流行病學(xué)調(diào)查和產(chǎn)地檢疫，引進(jìn)的牦牛群體當(dāng)中會(huì)存在個(gè)別的隱性患病病例或者處于慢性發(fā)病階段的患病牛，沒有實(shí)行針對(duì)性的封鎖隔離和針對(duì)性的檢疫檢驗(yàn)，到達(dá)養(yǎng)殖場(chǎng)之后立即混合養(yǎng)殖，從而造成了該種疾病在養(yǎng)殖場(chǎng)中的傳播流行，危及到動(dòng)物安全。詳細(xì)情況如表2所示。

3討論

3.1牦牛支原體病的危害

牦牛支原體病是由兩種類型的支原體感染引發(fā)的一種呼吸系統(tǒng)疾病，被稱為牛支原體肺炎，主要以纖維素型胸膜肺炎為主要特征，對(duì)牛養(yǎng)殖業(yè)構(gòu)成的危害較為嚴(yán)重，目前該種疾病在亞洲地區(qū)，非洲拉丁美洲的部分國(guó)家和地區(qū)廣泛發(fā)生流行。牛肺疫和牛支原體肺炎臨床特征十分相似，早在上世紀(jì)的30年代~40年代曾在西北、東北、內(nèi)蒙古、西藏等地區(qū)大部分發(fā)生流行。從1949年開始，我國(guó)針對(duì)牛肺疫啟動(dòng)了疫苗免疫接種、隔離、撲殺等綜合性的防控措施，有效控制了牛肺疫的傳播蔓延，1996年我國(guó)宣布徹底消滅了牛肺疫等重大傳染性疾病，2011年5月24日世界動(dòng)物衛(wèi)生組織第79屆的年會(huì)通過決議認(rèn)為中國(guó)是無牛傳染性胸膜肺炎的國(guó)家。進(jìn)入2008年之后，湖北地區(qū)從外地引進(jìn)的一批架子牛群當(dāng)中爆發(fā)了以壞死性肺炎和胸膜炎，常規(guī)的治療效果相對(duì)較差，并且很多牛群會(huì)繼發(fā)出現(xiàn)關(guān)節(jié)炎癥狀和繁殖障礙，對(duì)當(dāng)?shù)氐呐ｐB(yǎng)殖業(yè)造成了嚴(yán)重的損失。經(jīng)過鑒定不屬于牛肺疫，是由牛絲狀出現(xiàn)體感染引發(fā)的一種呼吸系統(tǒng)疾病，被稱為牛支原體肺炎[3]。該類疾病的傳播流行與運(yùn)輸密切相關(guān)。牛支原體疾病傳播流行速度相對(duì)較快，但發(fā)病周期相對(duì)較長(zhǎng)，造成的死亡率相對(duì)較低，主要以典型的呼 吸道癥狀為主，呼吸急促，呼吸不順暢，年齡越小的牛群對(duì)該種病原的易感性越強(qiáng)。青海地區(qū)牦牛養(yǎng)殖業(yè)是當(dāng)?shù)氐闹е援a(chǎn)業(yè)和主導(dǎo)產(chǎn)業(yè)，近年來隨著養(yǎng)殖密度的進(jìn)一步增大，以支原體肺炎為代表的呼吸系統(tǒng)疾病，在本地區(qū)呈現(xiàn)加重流行的態(tài)勢(shì)，流行范圍逐漸擴(kuò)大，發(fā)病流行率逐漸升高。盡管牛支原體病造成的死亡率相對(duì)較低，但是牛群一旦出現(xiàn)該種疾病會(huì)周期性的感染疾病，會(huì)對(duì)牛群的正常生長(zhǎng)發(fā)育產(chǎn)生嚴(yán)重威脅，甚至?xí)档惋暳系南寐剩焕谔岣唣B(yǎng)殖效益和養(yǎng)殖質(zhì)量，所以需要我們加強(qiáng)對(duì)該種疾病的流行病學(xué)調(diào)查，掌握該種疾病的流行特征。

3.2牦牛支原體病的流行特點(diǎn)

自然感染條件下，潛伏期很難確定。有研究結(jié)果表明臨床健康牛群在購(gòu)進(jìn)24h之后，鼻腔當(dāng)中就能夠檢測(cè)到牛支原體，但大部分牛在7d后經(jīng)鼻腔就能夠檢測(cè)到支原體，多數(shù)牛群在運(yùn)抵目的地2周左右相繼發(fā)病，不良的養(yǎng)殖環(huán)境以及中途遭受到應(yīng)激刺激均是造成該種疾病傳播流行的主要原因。感染牛支原體的牛群可以攜帶支原體數(shù)月，甚至長(zhǎng)達(dá)數(shù)年，是養(yǎng)殖場(chǎng)最主要的傳染源，病原主要通過飛沫呼吸道傳播近距離，接觸傳播吮吸乳汁和生殖道接觸也可以造成垂直傳播。在很多牦牛養(yǎng)殖場(chǎng)當(dāng)中支原體病通常和其他疾病混合感染，國(guó)外早期認(rèn)為細(xì)菌性病原主要有多殺性巴氏桿菌、溶血性蔓氏桿菌。但近年來研究發(fā)現(xiàn)，導(dǎo)致該種疾病的細(xì)菌性病原呈現(xiàn)逐漸增多的態(tài)勢(shì)，除了上述兩種致病原因之外還包括了化膿隱秘桿菌、昏睡嗜血桿菌等。此外某些病毒例如牛皰疹病毒、傳染性鼻血管炎病毒、副流感病毒、病毒性腹瀉病毒、呼吸道合胞體病毒、牛冠狀病毒、呼腸孤病毒都可以導(dǎo)致牛群出現(xiàn)嚴(yán)重的免疫抑制，促使細(xì)菌性病原增殖并下行到肺臟組織引發(fā)肺臟出現(xiàn)嚴(yán)重的病變，此時(shí)支原體就會(huì)大量繁殖，產(chǎn)生致病性。對(duì)于牦牛養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)來說，由于處于海拔高度較高，氣候寒冷，應(yīng)激因素相對(duì)較多，如果長(zhǎng)時(shí)間運(yùn)輸養(yǎng)殖方式突然發(fā)生變化，養(yǎng)殖條件突然發(fā)生，改變諸多應(yīng)激刺激，都會(huì)導(dǎo)致牛群的身體抵抗能力下降，這是引發(fā)支原體病傳播流行的主要原因。此外支原體感染會(huì)對(duì)牛群的免疫系統(tǒng)造成極大的破壞，進(jìn)一步促進(jìn)繼發(fā)感染混合感染，加大病原微生物的致病作用。除了細(xì)菌病毒出現(xiàn)混合感染之外，有研究表明血孢子蟲感染可能對(duì)牛支原體的發(fā)生起到一定的促進(jìn)作用。

3.3臨床診斷

對(duì)于牦牛支原體病在臨床診斷過程中，主要通過外在癥狀和臟器組織的病變情況對(duì)病情作出初步的判定。發(fā)病初期階段患病牛的體溫升高到42℃左右，精神狀態(tài)逐漸變差，采食量逐漸下降，并表現(xiàn)出典型的呼吸道癥狀，不斷的咳嗽氣喘，尤其是在清晨半夜或者氣溫發(fā)生突變時(shí)咳嗽癥狀逐漸加重，從鼻腔當(dāng)中會(huì)流出很多清亮或者膿性的鼻炎，病情加重時(shí)患病牛不能正常采食。成年牛群的發(fā)病周期相對(duì)較長(zhǎng)，患病牛生長(zhǎng)發(fā)育不良，身體逐漸消瘦，背毛雜亂，失去光澤，大量牛毛脫落，體表皮膚蒼白失去血色，有的患病牛會(huì)出現(xiàn)腹瀉，排出水樣腹無泄物，甚至?xí)诟篂a物當(dāng)中夾雜少量的糞便。有的患病牛排會(huì)出現(xiàn)關(guān)節(jié)炎，不能夠正常行走，關(guān)節(jié)腫大。也有的患病牛會(huì)表現(xiàn)出眼結(jié)膜發(fā)炎，眼結(jié)膜潮紅充血，大量膿性分泌物或漿液性分泌物從眼角當(dāng)中流出。發(fā)病一段時(shí)間之后，如果沒有及時(shí)采取措施進(jìn)行有效的防控，病情較為嚴(yán)重時(shí)患病牛群的呼吸道癥狀逐漸加重，死亡率能夠達(dá)到50%以上。通過解剖能夠發(fā)現(xiàn)病變位置主要集中在胸腔和肺臟組織，胸部和胸膜會(huì)出現(xiàn)不同程度的粘連現(xiàn)象，并且會(huì)蓄積有少量的粘液，心包積水比較嚴(yán)重，顏色呈現(xiàn)黃色澄清狀，在空氣當(dāng)中暴露一段時(shí)間之后逐漸凝固成纖維素性凝塊。肺臟組織病變最為明顯，肺臟出現(xiàn)不同程度的發(fā)炎腫脹現(xiàn)象，肺臟的病變程度往往與發(fā)病周期和機(jī)體的抵抗能力相關(guān)。身體抵抗能力相對(duì)較強(qiáng)的牛群主要表現(xiàn)為輕度的肺臟腫脹，肺尖葉、心葉、隔葉會(huì)出現(xiàn)紅色的肉樣病變，同時(shí)在肺臟組織表面還會(huì)出現(xiàn)化膿性的壞死病灶。病情加重之后在病變的肺臟組織會(huì)分布有大量的干酪樣或者化膿性的壞死病灶，病理組織檢查可以發(fā)現(xiàn)病死牛會(huì)存在支氣管肺炎或者化膿性壞死性肺炎，有時(shí)還會(huì)引發(fā)凝固性壞死性肺炎。

3.4實(shí)驗(yàn)室診斷

肺炎支原體自然條件下的培養(yǎng)難度相對(duì)較大，在無菌條件上可以采集病變的肺臟組織，將其接種到液體支原體培養(yǎng)基上，在二氧化碳環(huán)境下進(jìn)行液氧培養(yǎng)，一般培養(yǎng)4d~5d之后就能夠發(fā)現(xiàn)液體自然體培養(yǎng)基混濁，然后將培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移到固體支原體培養(yǎng)基上，相同的條件下持續(xù)培養(yǎng)3d~5d之后，在固體支原體培養(yǎng)基上能夠形成煎蛋狀的致病菌菌落，小心調(diào)取分離得到的致病菌進(jìn)行染色鏡檢，能夠發(fā)現(xiàn)革蘭氏陰性染色，但是染色不是很明顯的病原菌，姬姆薩染色劑能夠?qū)⒉≡境杉t色，在顯微鏡下能夠觀察到支原體呈現(xiàn)多種形態(tài)，有的呈現(xiàn)桿狀，有的呈現(xiàn)細(xì)絲狀，有的呈現(xiàn)逗點(diǎn)狀。另外在實(shí)驗(yàn)室診斷過程中，也可以采集患病牛的新鮮血液，進(jìn)行支原體全血凝集試驗(yàn)。
3.5防控措施

確診之后，首先將患病牛單獨(dú)隔離并做好養(yǎng)殖場(chǎng)未發(fā)病牛群的持續(xù)不間斷的血清檢測(cè)，檢測(cè)出隱性感染牛之后立即隔離淘汰，構(gòu)建無病的繁殖母牛群，并做好犢牛的隔離，投喂消毒的乳汁。通過妥善有效的凈化處理，能夠短時(shí)間的控制病情，培養(yǎng)健康無病的牛群。在未來牦牛支原體病防控過程中，應(yīng)該進(jìn)行引導(dǎo)基層地區(qū)的養(yǎng)殖戶加強(qiáng)牛群的針對(duì)性管理，堅(jiān)持封閉化的養(yǎng)殖管理模式，避免隨意從外地引進(jìn)牛群，減少交易環(huán)節(jié)，在引種之前應(yīng)該做好檢疫檢測(cè)，防止引進(jìn)患病牛、處于潛伏階段的帶菌牛。注重做好日常的養(yǎng)殖管理，保證圈舍通風(fēng)良好，控制合理的養(yǎng)殖密度，避免過于擁擠造成病情的傳播蔓延。根據(jù)牦牛的生長(zhǎng)發(fā)育情況，冬春季節(jié)應(yīng)該注重做好精飼料的補(bǔ)充，保證飼料中維生素、礦物質(zhì)元素添加合理。早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療是防控該種疾病的有效措施。早期選擇使用相應(yīng)的抗生素，能夠起到很好的治療效果。常用的抗生素包括了喹諾酮類抗生素，常見的包括了環(huán)丙沙星、泰樂菌素等。

4結(jié)束語

綜上所述，牛支原體病是高海拔牦牛養(yǎng)殖領(lǐng)域危害較為嚴(yán)重的一種呼吸系統(tǒng)疾病，該種疾病發(fā)病周期相對(duì)較長(zhǎng)，傳播速度較快，但造成的臨床癥狀相對(duì)較為緩和。由于該種疾病的傳播渠道多種多樣，成年牛群感染之后所表現(xiàn)出來的臨床特征十分緩和，如果沒有做好有效的凈化處理，將會(huì)對(duì)牦牛養(yǎng)殖業(yè)構(gòu)成毀滅性打擊。針對(duì)這一現(xiàn)狀就需要不斷加強(qiáng)所在地區(qū)牦牛養(yǎng)殖領(lǐng)域支原體病的流行情況調(diào)查，掌握牛群的感染情況，以便及時(shí)采取措施進(jìn)行有效的凈化，構(gòu)建無病的牦牛群，以此來推動(dòng)牦牛養(yǎng)殖的業(yè)的健康穩(wěn)定發(fā)展。

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作者:馬翠英 單位:青海省海北州門源縣浩門鎮(zhèn)人民政府